Presentiamo un protocollo per l'utilizzo di un sistema di perfusione sanguigna normotermica ex vivo per la somministrazione di terapie a un intero allotrapianto cardiaco in un modello di trapianto di cuore eterotopico suino.
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Articolo metodologico
Un protocollo di trapianto di cuore eterotopico suino per la somministrazione di terapie a un allotrapianto cardiaco
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il trapianto cardiaco è il trattamento gold standard per l'insufficienza cardiaca allo stadio terminale. Tuttavia, rimane limitato dal numero di cuori donatori disponibili e complicazioni come la disfunzione primaria dell'innesto e il rigetto dell'innesto. Il recente uso clinico di un dispositivo di perfusione ex vivo nel trapianto cardiaco introduce un'opportunità unica per il trattamento di alloinnesti cardiaci con interventi terapeutici per migliorare la funzione ed evitare risposte deleterie del ricevente. Stabilire un modello traslazionale di grandi animali per la somministrazione terapeutica all'intero allotrapianto è essenziale per testare nuovi approcci terapeutici nel trapianto cardiaco. Il modello di trapianto di cuore sucino ed eterotopico in posizione intraaddominale funge da modello eccellente per valutare gli effetti di nuovi interventi e l'immunopatologia del rigetto del trapianto. Questo modello offre inoltre una sopravvivenza a lungo termine per il maiale, dato che l'innesto non è necessario per mantenere la circolazione del ricevente. Lo scopo di questo protocollo è quello di fornire un approccio riproducibile e robusto per ottenere la consegna ex vivo di un allotrapianto terapeutico all'intero allotrapianto cardiaco prima del trapianto e fornire dettagli tecnici per eseguire un trapianto eterotopico di sopravvivenza del cuore perfuso ex vivo .
Introduzione
L'insufficienza cardiaca è una condizione che colpisce circa 6 milioni di adulti negli Stati Uniti e si prevede che aumenterà a 8 milioni di adulti entro l'anno 20301. Il trapianto cardiaco è il trattamento gold standard per l'insufficienza cardiaca allo stadio terminale. Tuttavia, non è privo di limiti e complicazioni. Rimane limitato dal numero di cuori donatori disponibili, dalla disfunzione primaria dell'innesto, dal rigetto del cuore e dagli effetti collaterali dell'immunosoppressione a lungo termine2. Queste limitazioni sono particolarmente importanti nei giovani riceventi che possono sperimentare il fallimento del....
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Protocollo
NOTA: Vengono selezionate due femmine di suini dello Yucatan, con uno designato come donatore di innesto cardiaco e l'altro come ricevente. Si raccomandano suini di età compresa tra 6 e 8 mesi, di peso di circa 30 kg e con gruppi sanguigni compatibili. La panoramica del protocollo è illustrata nella Figura 1. L'alloggiamento e le procedure di trattamento per i suini vengono eseguiti in conformità con le linee guida del Comitato per la cura e l'uso degli animali del Duke University Medical Center.
1. Preparazione del dispositivo di perfusione ex vivo
- Preparare il dispositivo d....
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Risultati
Questo gruppo è sopravvissuto con successo a 9 maiali tra 5 e 35 giorni dopo il protocollo presentato qui, a seconda del disegno dello studio. Su 10 suini che hanno subito questo protocollo, solo 1 è morto prematuramente per complicazioni chirurgiche, producendo un tasso di sopravvivenza del 90%. Dimostrato nella Figura 2 è un diagramma della configurazione di un cuore eterotopico trapiantato in posizione intraaddominale in un maiale. Quando si determina il sito per l'anastomosi dell'alloinn.......
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Discussione
La somministrazione di terapie durante la perfusione ex vivo nel trapianto cardiaco offre una strategia per modificare l'allotrapianto e potenzialmente migliorare i risultati del trapianto. Il protocollo qui presentato incorpora lo stoccaggio di perfusione sanguigna normotermica ex vivo all'avanguardia e offre un potenziale promettente per testare la consegna isolata di cellule, geni o immunoterapie all'allotrapianto 11,12,13.
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Dichiarazioni
Paul Lezberg è impiegato da TransMedics, Inc. Carmelo Milano ha ricevuto un dono finanziario da TransMedics, Inc. per finanziare interventi chirurgici di trapianto di cuore eterotopico. Michelle Mendiola Pla è supportato da T32HL007101. Gli altri autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
Ringraziamenti
Vorremmo ringraziare Duke Large Animal Surgical Core e Duke Perfusion Services per la loro assistenza durante queste procedure. Vorremmo anche ringraziare Paul Lezberg e TransMedics, Inc. per il supporto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 0 Sutura Maxon ad anello | Covidien | GMM-341L | Utilizzato per chiudere la fascia dell'incisione laparotomica |
| 0 Fascette di seta | Medtronic, Inc | S346 | |
| 18 G Angiocath | BD | 381144 | Utilizzato per de-arieggiare il ventricolo sinistro del cuore del donatore dopo l'impianto |
| 20 Fr Sfiato LV | Medtronic, Inc | 12002 | |
| 2-0 Suture di seta | Ethicon, Inc. | SA11G | |
| 2-0 Cravatte in seta | Ethicon, Inc. | Sutura in Vicryl SA65H | |
| 2-0 | Ethicon, Inc. | J259H | |
| Cannula venosa da 24 Fr | Medtronic, Inc | 68124 | |
| Suture in prolene 3-0 | Ethicon, Inc. | 8522 | |
| Sutura monocril 4-0 | Ethicon, Inc. | Y469G | |
| 4-0 Suture in prolene | Ethicon, Inc. | 8521 | |
| Tagliacapelli di animali | tagliacapelli Wahl | 8786-452 | |
| Morsetto aortico | V. Mueller | CH6201 | |
| Divaricatore della Marina dell'Esercito | V. Mueller | SU3660 | |
| ATF 40, set usa e getta salva | celle Fresenius Kabi | 9108494 | Inserto per dispositivo salva celle |
| Divaricatore Balfour | V. Mueller | SU3042 | Usato come divaricatore per parete addominale |
| C.A.T.S cell saver | Fresenius Kabi | ES0019 | Dispositivo di risparmio cellulare utilizzato per lavare il sangue del donatore |
| Defibrillatore cardiaco | Zoll | serie M | Defibrillatore |
| cardiaco Castro porta aghi | V. Mueller | CH8589 | |
| CG4 cartucce iStat | Abbott | 03P85-25 | test POC |
| CG8 cartucce iStat | Abbott | 03P88-25 | Test POC |
| Pinze DeBakey | V. Mueller | CH5902 | |
| Matita monouso per elettrocauterizzazione | Covidien | E2450H | |
| Pinze Gerald | V. Mueller | NL1451 | |
| Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater | Cincinnati Sub-Zero | 86022 | Riscaldatore di raffreddamento utilizzato per regolare la temperatura di perfusione sulla perfusione ex vivo dispositivo |
| iSTAT 1 | Abbott | 04P75-03 | Dispositivo di prova POC |
| Morsetto Kocher | V. Mueller | SU2790 | |
| Applicatore di clip grandi | Sklar | 50-4300 | |
| Clip grandi | Teleflex | 4200 | |
| Pegni morbidi grandi | Covidien | 8886867901 | |
| Applicatore di clip medio | Sklar | 50-4335 | |
| Clip medie | Teleflex | 2200 | |
| Forbice Metzenbaum | V. Mueller | CH2006-001 | |
| Lama per bisturi n. 10 | Swann-Mortan | 301 | Utilizzato per l'incisione cutanea |
| Lama per bisturi n. 11 | Kiato Plus | 18111 | Utilizzato per l'incisione vascolare |
| Dispositivo OCS con base | TransMedics, Inc. | Dispositivo di perfusione ex vivo | |
| OCS monouso | TransMedics, Inc. | Inserto per dispositivo di perfusione ex vivo con kit di perfusione | |
| Cavo di stimolazione | Remington Medical | FL-601-97 | |
| Catetere per cardioplegia pediatrica (4Fr) | Medtronic, Inc | 10218 | Utilizzato per erogare la cardioplegia alla radice aortica del donatore |
| Catetere di Foley pediatrico | Teleflex | RSH170003080 | Posizionato prima dell'intervento per decomprimere la vescica del ricevente |
| Forbici di Potts | V. Mueller | CH13038 | |
| Sacca a pressione x2 (1.000 mL) | Novaplus | V4010H | Utilizzato per erogare la cardioplegia a una pressione impostata |
| Morsetto Satinsky | V. Mueller | CH7305 | Morsetto vascolare utilizzato per creare anastomosi tra il cuore del donatore e i vasi riceventi |
| Forbici | Felco | FELCO 200A-50 | Utilizzato per eseguire la sternotomia |
| Piccoli impegni rigidi | Covidien | 8886867701 | |
| Divaricatore sternale | V. Mueller | CH6950-007 | |
| Fili di stimolazione cardiaca temporanea | Ethicon, Inc. | TPW32 | |
| Pacemaker temporaneo a doppia camera | Medtronic, Inc | 5388 | Dispositivo di stimolazione cardiaca |
| Kit laccio emostatico | Medtronic, Inc | 79005 | Lacci emostatici |
| Rummel Nastro ombelicale | Covidien | 8886861903 | |
| Passanti per vasi | Covidien | 31145686 |
Riferimenti
- Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 143 (8), 254(2021).
- Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K.
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Ristampe e permessi
