Questo studio ha stabilito un protocollo incentrato sul perfezionamento tecnico di un modello murino di ischemia-riperfusione renale bilaterale per la ricerca sul danno renale acuto.
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Articolo metodologico
Perfezionamento tecnico di un modello murino bilaterale di ischemia-riperfusione renale per la ricerca sul danno renale acuto
In questo articolo
Sommario
Abstract
L'arresto cardiaco rappresenta un grande onere per la salute pubblica. Il danno renale acuto (AKI) è un marcatore avverso nei sopravvissuti all'arresto cardiaco a seguito del ritorno della circolazione spontanea (ROSC) dopo una rianimazione cardiopolmonare riuscita. Al contrario, il recupero della funzione renale dall'AKI è un predittore di esiti neurologici favorevoli e di dimissione dall'ospedale. Tuttavia, manca un intervento efficace per prevenire il danno renale causato dall'arresto cardiaco dopo ROSC, suggerendo che sono necessarie ulteriori strategie terapeutiche. L'ipoperfusione renale e la riperfusione sono due meccanismi fisiopatologici che causano l'AKI dopo l'arresto cardiaco. I modelli animali di AKI indotta da ischemia-riperfusione (IR-AKI) di entrambi i reni sono paragonabili a quelli dei pazienti con AKI dopo ROSC in un contesto clinico. Tuttavia, l'IR-AKI di entrambi i reni è tecnicamente difficile da analizzare perché il modello è associato a un'elevata mortalità e a un'ampia variazione del danno renale, che può influenzare l'analisi. Sono stati scelti topi leggeri, posti in anestesia generale con isoflurano, sottoposti a chirurgia con approccio dorsolaterale e la loro temperatura corporea mantenuta durante l'operazione, riducendo così il danno tissutale e stabilendo un protocollo di ricerca IR-AKI renale acuto riproducibile.
Introduzione
L'arresto cardiaco si verifica più di 80.000 volte all'anno negli Stati Uniti 1,2. Il tasso di mortalità per arresto cardiaco è estremamente alto 3,4,5,6. L'AKI è un importante fattore di rischio associato a un'elevata mortalità e a scarsi esiti neurologici nei pazienti con arresto cardiaco dopo ROSC 7,8,9,10,11,12,13.
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati condotti in conformità con la Guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio, pubblicata dal National Institutes of Health degli Stati Uniti (pubblicazione NIH n. 85-23, rivista nel 1996). Il protocollo di studio è stato approvato e in conformità con le linee guida del Comitato Istituzionale per la Cura e l'Uso degli Animali presso l'Università Cattolica di Fu-Jen. Vedere la Tabella dei materiali per i dettagli su tutti i materiali e gli strumenti utilizzati in questo protocollo.
1. Preparare i topi
- Selezionare topi maschi C57BL/6 di ....
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Risultati
La qualità della chirurgia renale bilaterale IR-AKI deve essere valutata prima di ulteriori analisi microscopiche o molecolari. Durante l'intervento chirurgico, l'ischemia renale deve essere confermata osservando se il rene ha cambiato colore da rosa a rosso scuro subito dopo che il peduncolo renale è stato bloccato con una clip microvascolare (Figura 1). Dopo l'intervento chirurgico, il danno renale causato dalla chirurgia IR-AKI può essere ulteriormente convalidato con alcuni microlitri di.......
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Discussione
Il protocollo bilaterale IR-AKI proposto è adatto per studiare il meccanismo di ipoperfusione e riperfusione di entrambi i reni. Il protocollo suggerisce che i topi leggeri, l'anestesia generale con isoflurano, un approccio dorsolaterale all'intervento chirurgico e il mantenimento della temperatura corporea durante l'operazione mitigano le difficoltà tecniche associate, riducano la durata dell'intervento chirurgico e aumentino la coerenza della procedura per la ricerca IR-AKI renale bilaterale acuta.
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano che non vi è alcun conflitto di interessi per quanto riguarda la pubblicazione di questo articolo.
Ringraziamenti
Questo modello è stato sviluppato con il sostegno finanziario del Ministero della Scienza e della Tecnologia di Taiwan (MOST 109-2320-B-030-006-MY3). Questo manoscritto è stato curato da Wallace Academic Editing.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Sutura assorbibile, 6-0 | Ethicon | J510G-BX | |
| Soluzione di betadine | Shineteh Strument | ||
| Carprofen | Sigma | PHR1452 | |
| Batuffoli di cotone | Shineteh Strument | ||
| Graefe Forcipe | Fine Science Tools | 11051-10 | |
| Termoforo | Shineteh Strument | ||
| Isoflurano | Piramal Critical Care Inc. | 26675-46-7 | |
| Moria Vessel Clamp | Fine Science Tools | 18320-11 | |
| Olsen-Hegar porta aghi | Fine Science Tools | 12002 - 12 | |
| Saline | Shineteh Strument | ||
| Scalpello lame Shinva | s2646 | ||
| Macchina per anestesia per piccoli animali | Sheng-Cing Instruments Co. | STEP AS-01 | |
| Forbici per tessuti | Fine Science Tools | 14072 - 10 |
Riferimenti
- Holmberg, M. J., et al. Annual incidence of adult and pediatric in-hospital cardiac arrest in the United States. Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 12 (7), 005580(2019).
- Benjamin, E. J., et al.
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Ristampe e permessi
