Il presente protocollo descrive tutti i passaggi essenziali per il successo del trapianto uterino (UTx) nei ratti. Il modello di ratto si è dimostrato adatto a promuovere l'implementazione clinica di UTx; tuttavia, rat UTx è una procedura molto complessa che richiede istruzioni accurate.
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Articolo metodologico
Approccio chirurgico, sfide e risoluzioni per il trapianto di utero nei ratti
In questo articolo
Sommario
Abstract
Il trapianto uterino (UTx) è un nuovo approccio per il trattamento delle donne con infertilità assoluta del fattore uterino (AUFI). Si stima che il 3% -5% delle donne soffra di AUFI. Queste donne sono state private della possibilità di avere figli fino all'avvento di UTx. L'applicazione clinica di UTx è stata guidata da studi sperimentali su animali e il primo UTx di successo è stato raggiunto nei ratti. Date le loro caratteristiche fisiologiche, immunologiche, genetiche e riproduttive, i ratti sono un sistema modello adatto per tali trapianti. In particolare, il loro breve periodo di gestazione è un chiaro vantaggio, poiché l'endpoint abituale dell'UTx sperimentale è la gravidanza di successo con parto vivo. La sfida più grande per i modelli di ratto rimane la piccola anatomia, che richiede competenze microchirurgiche avanzate ed esperienza. Sebbene UTx abbia portato alla gravidanza in clinica, la procedura non è stabilita e richiede una continua ottimizzazione sperimentale. Qui viene presentato un protocollo dettagliato, inclusa la risoluzione dei problemi essenziali per il ratto UTx, che dovrebbe rendere l'intera procedura più facile da comprendere per coloro che non hanno esperienza in questo tipo di microchirurgia.
Introduzione
Il trapianto uterino (UTx) è un nuovo trattamento per l'infertilità assoluta del fattore uterino (AUFI). L'AUFI deriva da un'assenza (congenita o acquisita) o da una malformazione dell'utero e colpisce il 3%-5% delle donne in tutto il mondo1. Ragioni etiche, legali o religiose escludono l'adozione o la maternità surrogata per molte donne che hanno un desiderio di maternità ma soffrono di AUFI2. Per queste donne, UTx rimane l'unica opzione per iniziare la propria famiglia. UTx è stato applicato in clinica, anche se con successo misto; La procedura è tecnicamente impegnativa e richiede un miglioramento costante per il suo ....
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Protocollo
Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti secondo le prescrizioni federali svizzere sugli animali e approvati dall'Ufficio veterinario di Zurigo (n° 225/2019), garantendo la cura dell'uomo. Le femmine di ratto vergine di Lewis (peso corporeo di 170-200 g) e le femmine di ratto vergine bruno norvegese (170-200 g) sono stati utilizzati come donatori / riceventi dell'utero, mentre i ratti Lewis maschi (300-320 g) sono stati utilizzati per l'accoppiamento. I ratti avevano un'età compresa tra 12 e 15 mesi. Gli animali sono stati ottenuti da fonti commerciali (vedi Tabella dei materiali) e sono stati alloggiati in condizioni controllate e in u....
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Risultati
Vengono presentati i risultati di due gruppi di ratti. UTx è stato effettuato prima (gruppo 1, n = 8) e dopo (gruppo 2, n = 8) aggiustamento del protocollo (Tabella 1) per dimostrare gli effetti delle nostre modifiche (si veda la Discussione per una spiegazione delle nostre modifiche)12,15,21.
L'esito dell'UTx del ratto è associato a tre fasi chiave. La prima fase è i.......
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Discussione
Il protocollo qui presentato offre istruzioni dettagliate per l'approccio chirurgico alla base del trapianto di utero nei ratti. Il protocollo è stato ottimizzato per aumentare le probabilità di nascite vive dopo UTx e successivo accoppiamento. Il protocollo originale è stato ripreso dal gruppo Brännström 12,13, ispirato al lavoro sui topi di Akouri et al.10, e modificato in base alle esperienze degli autori negli ultimi anni. In quanto ta.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi concorrenti.
Ringraziamenti
Questo studio è stato sostenuto dal Fondo nazionale svizzero per la ricerca scientifica (sovvenzione del progetto n. 310030_192736). Ringraziamo la dottoressa Frauke Seehusen dell'Istituto di patologia veterinaria dell'Università di Zurigo per il suo sostegno istopatologico.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Forbice angolata su laterale 5 mm | F.S.T | 15008-08 | |
| Graffetta grande | No specifico | Usato come divaricatore | |
| Ago per piega smussata G30 | Unimed S.A. | ||
| Bupivacaina 0,5% | Sintetica | ||
| Buprenorfina 0,3 mg/mL | Temgesic | ||
| Dosiernadel G25 | H.SIGRIST& PARTNER AG | ||
| Dumont #5SF Pinze | F.S.T | 11252-00 | |
| Ethilon 10/0 | Ethicon | 2810G | |
| Ethilon 6/0 | Ethicon | 667H | |
| Ethilon 7/0 | Ethicon | EH7446H | |
| Ethilon 8/0 | Ethicon | 2808G | |
| Femal Brown Norway Rats (150-170 g) | Janvier | ||
| Ratti Lewis femmina (150-170 g) | Charles River Deutschland | ||
| Forbici fini - Sharp | F.S.T | 14060-09 | Qualsiasi altra piccola forbice funziona troppo |
| Halsey Micro Needle Holder | F.S.T | 12500-12 | Qualsiasi altro piccolo needholder funziona troppo |
| Heparin Natrium 25000 I.E./ 5 mL | B. Braun | ||
| Institute Georges Lopez Perfusion Solution ( IGL) | Institute Georges Lopez | Soluzione per la conservazione degli organi | |
| Ratti Lewis maschi (300-320 g) | Charles River Deutschland | ||
| Micro Serrefines 13 mm | F.S.T | 18055-04 | |
| Micro Serrefines 16 mm gebogen | F.S.T | 18055-06 | |
| Micro-Serrefine Applicatore a morsetto con serratura | F.S.T | 18056-14 | |
| Mö lnlyncke Op asciugamano | Mö lnlyncke | 800300 | Telo sterile |
| NaCl 0,9% | B.Braun | ||
| Octenisept | Schü lke | ||
| Nastro di carta | Tesa | Per fissare l'animale | |
| Philips Avent Schneller Flaschenwä rmer SCF358/02 | Philips | 12824216 | |
| Ringerfundin | B.Braun | ||
| Rompun 2% | Bayer | Xylazine | |
| Portaaghi con manico rotondo | F.S.T | 12075-12 | |
| Portaaghi con manico rotondo | FST | 12075-12 | |
| S & Pinza dilatatrice per vasi a T - Angolata 45 gradi | F.S.T | 00276-13 | |
| Sacryl Naht | KRUUSE | 152575 | |
| Scapel No 10 | Swann Morton | 201 | |
| Small Histo-Container | Qualsiasi piccolo histo-container | ||
| Piccoli sacchetti di plastica Plastik Qualsiasi | sacchetto di plastica trasparente va bene | ||
| Steril Cotton fioc | Lohmann-Rauscher | Qualsiasi batuffolo di cotone sterillo va bene | |
| Garza sterile | Lohmann-Rauscher | Qualsiasi garza sterile va bene | |
| Forbice dritta 8mm | F.S.T | 15024-10 | |
| Microscopio operatorio - ndash; SZX9 | Olympus | OLY-SZX9-B | |
| Sutter Antiaderente GLISS 0,4 mm | Sutter | 78 01 69 SLS | |
| Pinza per legatura di sutura | F.S.T | 00272-13 | |
| Tappetino riscaldante ThermoLux | tessuti ThermoLux | ||
| per pelle | Tutte le pinze per tessuti vanno bene | ||
| Pinze per dilatatori per vasi | F.S.T | 00125-11 | |
| Vicryl più 4/0 | Ethicon | VCP292H |
Riferimenti
- Richards, E. G., et al. Uterus transplantation: state of the art in 2021. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).
- Jones, B. P., et al. Op....
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Ristampe e permessi
