Valutazione della funzione ventricolare destra in modelli sperimentali di ipertensione arteriosa polmonare

Summary

La presentazione di metodi dettagliati per la valutazione della funzione del ventricolo destro migliorerà la qualità e l'affidabilità della ricerca sull'ipertensione polmonare, offrendo un solido quadro per studi futuri e migliorando la riproducibilità tra diversi laboratori.

Abstract

L'ipertensione polmonare (PH) è una condizione cronica associata a una ridotta sopravvivenza, il che la rende un'area critica di ricerca. I modelli sperimentali di PH hanno migliorato significativamente la nostra comprensione della sua fisiopatologia e facilitato la progettazione di piccoli studi osservazionali e clinici. Tuttavia, è fondamentale stabilire metodologie standardizzate per garantire la comparabilità tra diversi studi sperimentali e gruppi di ricerca. La standardizzazione non solo migliora la riproducibilità, ma favorisce anche la collaborazione tra i team di ricerca.

In questo video, delineiamo i passaggi metodologici necessari per analizzare accuratamente i parametri funzionali dell'PH. Questi includono la valutazione ecocardiografica, la puntura invasiva del ventricolo destro (RV) e il calcolo dell'indice di Fulton. Per quanto riguarda l'ecocardiografia, vengono presentati in dettaglio la misurazione del tempo di accelerazione arteriosa polmonare e del rapporto tra il tempo di eiezione polmonare, nonché il calcolo della gittata ventricolare destra. Per quanto riguarda le misurazioni invasive, vengono descritte le procedure essenziali, tra cui i protocolli di anestesia, il posizionamento ottimale degli animali, l'impostazione della ventilazione meccanica, l'apertura precisa della parete toracica, la visualizzazione del RV e le tecniche di puntura del RV.

Viene spiegata in dettaglio la metodologia per la dissezione ventricolare (indice di Fulton), così come il calcolo del rapporto RV/ventricolo sinistro più setto, corretto per il peso corporeo dell'animale. Riteniamo che fornire una presentazione dettagliata di questi metodi migliorerà la qualità e l'affidabilità della ricerca sull'PH, offrendo un solido quadro per studi futuri e migliorando la riproducibilità tra diversi laboratori.

Introduction

Un'adeguata misurazione funzionale della funzione del ventricolo destro (RV) nei piccoli animali è diventata essenziale dopo l'aumento degli studi che utilizzano modelli animali nelle scienze respiratorie e cardiovascolari. Esistono diversi modelli animali di ipertensione polmonare (PH), che utilizzano monocrotalina¹, ipossia² o Sugen + ipossia³. Sono serviti bene per svelare nuovi percorsi fisiopatologici ^1,4 e studiare nuovi potenziali trattamenti farmacologici⁵ e non farmacologici⁶ per l'P....

Protocol

Il protocollo di studio è stato approvato dal Comitato Etico per l'Uso degli Animali (CEUA) dell'Università Federale di Rio de Janeiro con il numero di processo 043/22. Tutte le procedure sono state conformi ai Principi della cura degli animali da laboratorio e alla Guida dell'Accademia Nazionale delle Scienze degli Stati Uniti per la cura e l'uso degli animali da laboratorio. Lo studio ha seguito le linee guida ARRIVE¹¹.

1. Preparazione animale e protocollo sperimentale

1. Calcolare il numero di animali come riportato in precedenza¹².
   NOTA: Tenendo conto che le di....

Results

Per le analisi statistiche, ogni variabile è stata testata per la normalità e la varianza utilizzando il test di Shapiro-Wilk. I dati sono presentati come medie ± deviazione standard. Il test t non appiato è stato utilizzato per confrontare le concentrazioni di particelle nei gruppi di controllo (CTRL) e ipertensione arteriosa polmonare (PAH) (p<0,05).

Alterazioni ecocardiografiche nel modello animale di PAH
La Figura 4 mostra che .......

Discussion

La PAH è una malattia progressiva caratterizzata da un eccessivo rimodellamento vascolare, che promuove un aumento della resistenza vascolare polmonare, con conseguente aumento del postcarico RV¹⁴. Di conseguenza, la RVSP rappresenta una variabile funzionale che è direttamente correlata alla gravità della PAH¹⁵. Nel tempo, la risposta adattativa del ventricolo destro è l'ipertrofia concentrica compensatoria (misurata dall'indice di Fulton)<.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reagents
Alcohol 70%	Montenegro	ALC70-001
Gel conduttivo	Mercor	CG-002
Soluzione salina (NaCl 0,9%)	BioPharma	SAL-009
Instruments
19 G set	di vene del cuoio capellutoDescarpack	SVS-19G
Pinze kelly curve	ABC instrumentos cirurgicos	CKF-003
Kelly forcipe	ABC instrumentos cirurgicos	KF-004
Aghi (18, 22 e 26 G)	Descarpack	NDL-MIX
Piastra di Petri	GlassLab	PD-150
Lama di rasoio	ABC instrumentos cirurgicos	RB-005
Bisturi	ABC instrumentos cirurgicos	SC-006
Forbici	ABC instrumentos cirurgicos	SCIS-007
Linea di sutura	ABC instrumentos cirurgicos	SUT-008
Siringhe (1, 3 e 5 mL)	Descarpack	SYR-135
Cannula per tracheostomia	MedTech	TC-010
Pinzetta	ABC instrumentos cirurgicos	TWZ-011<
strong>Farmaci
Dextroketamine cloridrato 5%	Cristá lia	DXT-005	87,5 mg/kg intraperitoneale
Isoflurano 1 mL/mL 240 mL	Cristá lia	ISO-240	Soluzione per inalazione al 2,5%
Lidocaina cloridrato 1%	Cristá lia	LID-001	400 µ L sottocutaneo localmente
Monocrotalina	Sigma-Aldrich	C2401	60 mg/kg intraperitoneale
Pancuronio bromuro 2 mg/mL	Cristá lia	PAN-002	2 mg/kg eparina sodica per via endovenosa
5000 UI/mL	Cristá lia	HEP-5000	diluito 1:4 in 1 mL
Xilazina cloridrato 2%	Syntec	XYL-002	12,5 mg/kg intraperitoneale
Equipment
GraphPad Prism 9	GraphPad Software, Inc	GP9
Monitor veterinario multiparametrico in rete LifeWindow 9x	Digicare Animal Health	LW9x
Software LabView	National Instruments, Corp.	LV-2019
MATLAB R2019a (Versione) software	The MathWorks, Inc.	MATLAB-2019
Monitor e trasduttore di segnale	MedTech	MST-015
Bilancia di precisione	Sartorius	PS-020
R540 Mouse & Macchina per anestesia animale per ratti	RWD Life Schience Co., LTD	R540-ANA
Scala	Ohaus	SCL-025
Servo-i ventilatore meccanico...	Getinge AB	SERVO-I	FiO2 = 21%; volume corrente = 8 ml/kg, frequenza respiratoria = 70 bpm e PEEP = 3 cmH2O
Software SonoView	SONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbH	SV-2020
UGEO HM70A system	Samsung Eletrô nica da Amazô nia LTDA	HM70A
G*Power 3.1.9.7	Università di Dü sseldorf, Germania	gpower