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Articolo di ricerca
Presentiamo un flusso di lavoro monocentrico, validato dalla patologia, per le pazienti con tumore al seno (BC) che sviluppano un secondo carcinoma primario al polmone (pLC). Dimensioni tumorali primarie maggiori e Ki-67 più elevate definiscono il rischio, mentre OS a livello di coorte e iDFS rimangono comparabili. I risultati supportano l'imaging toracico stratificato per rischio e la correlazione patologica precoce nel follow-up.
Abbiamo condotto uno studio retrospettivo monocentrico su pazienti con tumore al seno (BC) che hanno sviluppato un secondo tumore polmonare primario (pLC) (BC-pLC; n = 54) rispetto a solo BC (n = 216) sottoposte a interventi chirurgici curative-intent dal 2012 al 2017, con follow-up fino al 30 giugno 2023. Sono state confrontate le variabili clinicopatologiche; regressione logistica multivariabile stimata dei correlati di BC-pLC; la sopravvivenza è stata valutata con stime di Kaplan-Meier e modelli di rischio proporzionale di Cox. Rispetto a BC, la coorte BC-pLC presentava frequenze più elevate di tumori negativi ai recettori degli estrogeni (ER-negativi) e progesterone negativi (PR-negativi) e più tumori Ki-67-positivi; dopo l'aggiustamento di molteplicità (Bonferroni), la negatività di ER e la positività di Ki-67 sono rimaste significative, mentre il recettore del fattore di crescita epidermico umano 2 (HER2) non lo è stato. Nelle analisi multivariabili, dimensioni tumorali maggiori (>2 cm) e positività di Ki-67 erano associate indipendentemente a BC-pLC (odds ratio [OR] 3,02, IC 95% 1,29-7,38; OR 3,10, IC 95% 1,32-7,49). A livello di coorte, le differenze nella sopravvivenza complessiva (OS) e nella sopravvivenza invasiva senza malattia (iDFS) tra BC-pLC e BC non sono state statisticamente significative dopo l'aggiustamento. Le analisi stratificate per biomarcatori hanno mostrato un sistema operativo peggiore per tumori ER-negativi e iDFS nominalmente migliore per i tumori Ki-67-negativi. Il carico tumorale e l'attività proliferativa possono guidare la sorveglianza stratificata per immagini toraciche stratificate a rischio e la correlazione patologica precoce per distinguere la metastasi dai nuovi primari durante il follow-up della contraccezione.
Il cancro al seno (BC) è tra le neoplasie più comuni nel mondo, e i progressi nello screening e nella terapia hanno prolungato la sopravvivenza, aumentando la probabilità di più primari multipli; in particolare, il rischio di un secondo tumore primario al polmone (pLC) è più alto nei sopravvissuti alla BC rispetto alla popolazionegenerale 1. Il cancro ai polmoni (LC) rimane una delle principali cause di mortalità per cancro, con una sopravvivenza costantemente bassa a 5 anni nonostante i progressi terapeutici 2,3. I modelli specifici per sesso sono sempre più riconosciuti: la proporzione di LC nelle donne è aumentata, e i tumori nelle donne spesso presentano alterazioni fattrici agibili come mutazioni EGFR 4,5. Il contesto ormonale (ad esempio, segnalazione estrogenica) e l'età — entrambi fattori cancerogeni stabiliti — possono contribuire all'aumento del rischio di LC osservato tra i sopravvissuti alla pillola anticoncevole, insieme a esposizioni condivise (tabacco, radioterapia, storia familiare), effetti terapeutici, suscettibilità ereditaria e vie oncogeniche sovrapposte (EGFR, KRAS, TP53, BRCA1)6.
La BC con secondo LC primario (BC-pLC) può presentarsi in modo sincrono (rilevato durante l'analisi diagnostica della BC) o metacronicamente (che sorge da mesi a anni dopo la BC)7. In pratica, la diagnosi e la gestione sono una sfida. Una frazione significativa dei casi viene notata per la prima volta come noduli polmonari nella TAC toracica di routine dopo il trattamento con la pillola anticoncevole, tuttavia le comparse radiologiche della pLC e delle metastasi polmonari dalla BC spesso si sovrappongono, portando a una classificazione iniziale errata e a ritardi nella diagnosi definitiva del tessuto 8,9. Circa un terzo dei casi di BC-pLC sono sincroni (intervallo diagnostico <6 mesi)10. Il sequenziamento del trattamento (seno prima vs polmone prima) può influenzare il rischio perioperatorio e le opzioni di adiuvante, ma le linee guida standardizzate restano limitate e la sopravvivenza a 5 anni varia tra le serie, riflettendo in parte differenze nella selezione e nella gestione.
I registri multicentrici offrono ampiezza e potenza statistica, ma le analisi retrospettive a singolo centro forniscono una profondità unica: vie di imaging armonizzate, flussi di lavoro patologici uniformi e valutazione da parte di un team multidisciplinare dedicato permettono una validazione clinicopatologica a grana fine con un follow-up interno coerentee a lungo termine 11. Queste caratteristiche sono particolarmente preziose per distinguere la metastasi intratoracica da una seconda primaria, dove piccoli errori di classificazione possono distorcere gli esiti e le decisioni terapeutiche. Riconosciamo, tuttavia, che il disegno a centro singolo limita la generalizzabilità rispetto alle coorti su scala di registro12.
Applicabilità pratica. Quantificando i correlati clinicopatologici di BC-pLC (ad esempio, la dimensione primaria del tumore BC e l'indice proliferativo di Ki-67) e riportando la sopravvivenza con denominatori chiari e dimensioni d'effetto, questo studio mira a supportare la sorveglianza della TAC toracica stratificata in base al rischio, la revisione multidisciplinare anticipata dei noduli indeterminati e strategie di acquisizione tissutale adattate per distinguere la metastasi dai nuoviprimari 13,14. In contesti dove i risultati di imaging sono ambigui, segnali clinicopatologici facilmente reperibili possono dare priorità ai pazienti per una correlazione patologica accelerata.
In questo contesto, abbiamo cercato di delineare il profilo clinicopatologico del BC-pLC, identificare i fattori associati alla sua presenza e valutare le implicazioni prognostiche utilizzando i modelli Kaplan-Meier e Cox per la sopravvivenza complessiva (OS) e la sopravvivenza invasiva libera da malattie (iDFS). Per posizionare in modo trasparente il contributo di un disegno a centro singolo, integriamo le analisi primarie con modelli stratificati a intervalli e adattati al trattamento, indicando chiaramente vantaggi e limitazioni metodologiche.
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Questo studio retrospettivo è stato approvato dal comitato etico istituzionale 2024YX070 e condotto in conformità con la Dichiarazione di Helsinki. Data la natura non interventista e de-identificata del dataset e il rischio minimo, il consenso informato è stato rinunciato secondo la politica istituzionale. I dati venivano memorizzati su server sicuri e controllati dagli accessi, e le analisi utilizzavano un dataset anonimizzato e bloccato con una traccia verificabile e una data di congelamento dati predefinita.
Progettazione dello studio e contesto
Abbiamo condotto uno studio retrospettivo a coorte monocentrico includendo pazienti con cancro al seno (BC) che hanno sviluppato un secondo tumore primario ai polmoni (pLC) (BC-pLC) e pazienti contemporanee con solo BC. Tutti i pazienti hanno subito interventi chirurgici a intento curativo tra gennaio 2012 e gennaio 2017, con follow-up fino al 30 giugno 2023. La coorte BC-pLC richiedeva la conferma patologica sia del carcinoma primario che del carcinoma primario ai polmoni; la coorte di BC includeva solo pazienti con BC primaria. Non è stato effettuato l'abbinamento del punteggio di propensione ed è riconosciuto come una limitazione; Per mitigare il bias di selezione, le covariate sono state predefinite per l'aggiustamento multivariabile e sono riportate in modo trasparente. La BC-pLC sincrona è stata definita come un intervallo diagnostico di ≤6 mesi tra primarie e la BC-pLC metacrona come >6 mesi. Un diagramma di flusso che riassume screening, esclusioni, inclusioni e analisi è presentato nella Figura 1.
Criteri di idoneità e valutazione dei casi
I partecipanti idonei avevano un'età di ≥18 anni con anticoncepzione primaria in stadio patologico precoce confermata, variabili clinicopatologiche fondamentali disponibili, imaging per revisione e blocchi/vetrine per la revisione patologica centrale quando indicato. I pazienti sono stati esclusi se presentavano una malignità concomitante in un altro sito, evidenza radiologica o patologica di metastasi polmonare da BC, BC metastatica o ricorrente alla diagnosi indice, o dati di follow-up incompleti. La classificazione delle lesioni polmonari come cancro polmonare primario piuttosto che anticoncepzionali metastatici si basava sull'istomorfologia e, quando disponibile, su un profilo immunofenotipico coerente con l'origine polmonare (ad esempio, TTF-1/Napsin A per adenocarcinoma e p40 per differenziazione squamosa). I casi discordanti o indeterminati sono stati risolti per consenso multidisciplinare (chirurgia del seno, chirurgia toracica, radiologia, patologia).
Protocollo di imaging e sorveglianza
Durante l'assistenza alla contraccezione, l'imaging toracico ha seguito percorsi istituzionali che includevano la TAC di stadio basale alla diagnosi e la TAC di sorveglianza tipicamente ogni 6-12 mesi nei primi 2-3 anni, e annualmente dopo, o prima se sintomi o anomalie richiedevano l'imaging di studio. I parametri di acquisizione sono stati standardizzati secondo i protocolli radiologici. Poiché l'intensità della sorveglianza può influenzare la rilevazione e la distribuzione degli stadi, il bias potenziale di rilevamento/tempo di anticipazione è stato affrontato nelle analisi di sensibilità considerando l'intensità di imaging e il periodo calendario.
Flusso di lavoro della patologia e immunoistochimica
I campioni tumorali sono stati fissati in formalina tamponata neutra, 4%, tipicamente 6-24 min/mm di spessore tissutale (convenzionalmente 6-24 ore per campioni di routine), disidratati e incorporati nella paraffina prima della sezione. Sezioni di 3-4 μm furono tagliate e montate su carrelle cariche. Il recupero dell'epitopo indotto dal calore è stato eseguito utilizzando un tampone di citrato (pH 6,0) o un tampone EDTA (pH 9,0) a 95-100 °C per circa 20 minuti, seguito da un raffreddamento a temperatura ambiente per 10 minuti. Gli anticorpi primari per ER, PR, HER2 e Ki-67 sono stati applicati secondo protocolli di laboratorio validati con incubazione tipica di 30-60 minuti a temperatura ambiente, rilevamento secondario basato su polimeri e sviluppo di DAB per 5-10 minuti; Le vetrine sono state controcolorate con ematossilina per 30-60 secondi, disidratate, pulite e montate. ER e PR positività sono stati definiti come ≥1% di colorazione nucleare tumore-cellula. HER2 ha seguito i criteri ASCO/CAP 2018 (3+ tramite IHC o amplificazione tramite ibridazione in situ quando 2+ e equivoco). Ki-67 è stato dicotomatizzato a un limite predefinito del 14%. Due patologi certificati hanno esaminato indipendentemente tutte le vetrine e le discrepanze sono state risolte per consenso per standardizzare la punteggeria.
Condizioni di conservazione del biocampione
I blocchi fissati nella formalina, incorporati in paraffina (FFPE), venivano conservati a temperatura ambiente controllata (18-25 °C), asciutti e bui, mantenendo l'umidità ambientale sotto il 60%. I blocchi venivano mantenuti per ≥10 anni secondo la politica istituzionale, e il ritaglio dal blocco originale veniva effettuato ogni volta che l'età della sezione superava le finestre di stabilità predefinite. Le sezioni non colorate (3-4 μm) venivano conservate in scatole sigillate con essiccante, protette dalla luce. Per l'immunoistochimica (ER, PR, Ki-67), le vetrine non colorate venivano refrigerate a 2-8 °C e colorate entro 8 settimane dalla sezionazione; le slide più vecchie di questa soglia venivano scartate e ritagliate. Per l'ibridazione in situ /conferma FISH dei risultati HER2 equivoci, sono stati utilizzati vetrini non colorati entro 2-4 settimane dalla sezionazione a 2-8 °C, o ritagliati se più vecchi. La temperatura di stoccaggio e le date di sezionamento venivano registrate nel sistema informativo del laboratorio, e qualsiasi deviazione provocava un nuovo taglio prima della tintura.
Raccolta e gestione dei dati
Le variabili demografiche e clinicopatologiche sono state estratte dalla cartella clinica elettronica secondo un dizionario dati predefinito. Le variabili includevano età al momento della diagnosi, stato menopausale, ipertensione, storia familiare, dimensione del tumore primario, sottotipo e grado istologico, stato nodale e numero di linfonodi esaminati, invasione linfovascolare e stato dei biomarcatori per ER, PR, HER2 e Ki-67. I sottotipi istologici e la stadiazione TNM sono stati riassunti descrittivamente nelle Tabelle 1 e 2, con note chiarificanti per abbreviazioni e definizioni di sottogruppi. Le procedure di qualità dei dati comprendevano controlli di intervallo e logica e la verifica della fonte da parte di un secondo revisore. Le analisi sono state riprodotte da un dataset bloccato con un codebook documentato e un manifesto.
Esiti e follow-up
La sopravvivenza complessiva (OS) è stata misurata dalla data della diagnosi di cancro fino alla morte per qualsiasi causa o al follow-up più recente. La sopravvivenza invasiva senza malattia (iDFS) è stata calcolata dalla fine del trattamento curativo fino all'insorgenza di una recidiva invasiva, allo sviluppo di una nuova malignità primaria o alla morte per cause non correlate. I pazienti vivi senza eventi venivano censurati all'ultimo contatto. Il controllo è stato effettuato tramite contatti telefonici, visite cliniche e revisione elettronica della cartella clinica fino al 30 giugno 2023. La mortalità specifica per causa non è stata valutata; Non sono quindi state effettuate analisi dei rischi concorrenti, e questa limitazione è indicata nella Discussione.
Analisi statistica
Le variabili continue sono state valutate per normalità tramite il test di Shapiro-Wilk e riassunte come mediana (IQR) o media (SD) a seconda dei conti, e variabili categoriche come n (%). I confronti di gruppo utilizzavano il test t o il test della somma dei rangi di Wilcoxon e il test del chi-quadrato o il test esatto di Fisher, dove appropriato. Per i correlati di BC-pLC, la regressione logistica univariabile è stata seguita dalla regressione logistica multivariabile utilizzando variabili a priori (categoria dimensione tumorale, ER, PR, Ki-67), con considerazioni eventi per variabile, fattori di inflazione della varianza per la collinearità e diagnostica standard della bontà dell'adattamento. La sopravvivenza è stata valutata con stime di Kaplan-Meier e test log-rank e con modelli Cox a rischio proporzionale che prespecificavano età, dimensione del tumore, stato linfonodale, ER, PR, HER2, Ki-67 e coorte (BC-pLC vs BC). Le ipotesi di rischio proporzionale sono state valutate utilizzando residui di Schoenfeld. I dati mancanti sono stati gestiti con un'analisi completa del caso, e l'entità della mancanza si riflette in denominatori. Dati confronti multipli tra biomarcatori su ER, PR, HER2 e Ki-67, il controllo degli errori a famiglia ha utilizzato l'aggiustamento di Bonferroni con un ɑ aggiustato di 0,0125, e sono riportati anche valori nominali di P bilaterale. Tutti i valori P nel testo e nelle tabelle sono abbinati a dimensioni degli effetti e intervalli di confidenza al 95%.
Analisi di sensibilità e robustezza
La robustezza è stata esaminata tramite analisi di sopravvivenza stratificate per intervalli che hanno confrontato i casi sincroni con i casi metacroni classificati come ≤12 mesi, 13-36 mesi e >36 mesi, con rapporti di rischio aggiustati riportati insieme a intervalli di confidenza del 95% e valori nominali di P. È stato utilizzato un approccio fondamentale a 12 mesi per mitigare il bias di garanzia nel tempo, dove terapie post-operatorie o adiuvanti potrebbero altrimenti distorcere le stime time-to-event. Modelli aggiuntivi adattati per le classi di trattamento ove disponibili, inclusi il tipo di intervento chirurgico polmonare, l'esposizione alla radioterapia e le categorie di terapia sistemica (chemioterapia, terapia mirata, immunoterapia). Le analisi di sensibilità hanno inoltre considerato l'intensità della sorveglianza per immagini e il periodo calendario per affrontare potenziali scelte e bias di tendenza secolare.
Punti di controllo di riproducibilità
I principali checkpoint che influenzano la riproducibilità includevano criteri di valutazione espliciti che distinguevano il cancro polmonare primario dalla BC metastatica, soglie predefinite per ER, PR, HER2 e Ki-67, letture patologiche indipendenti doppie con risoluzione consensuale, segnalazione trasparente dell'intensità della sorveglianza per immagini e specificazione a priori delle covariate con controllo molteplice. Qualsiasi deviazione dal protocollo è stata documentata, inclusa la motivazione e una valutazione del loro potenziale impatto sui risultati.
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Caratteristiche di base
Il percorso di selezione del paziente è mostrato nella Figura 1. Le caratteristiche clinicopatologiche di base sono riassunte nella Tabella 1. L'età mediana era di 51 anni (IQR 45-59) nella coorte BC e di 52 anni (IQR 46-60) nella coorte BC-pLC. Rispetto alla BC, la coorte BC-pLC presentava tumori primari al seno più grandi e una proporzione più alta di malattia T2-T4; La metastasi...
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Il crescente riconoscimento di tumori primari multipli riflette i progressi nell'imaging, nelle terapie e nella sorveglianza longitudinale, uniti a una maggiore sopravvivenza e all'interazione di fattori genetici eambientali 15,16. Utilizzando dati clinicopatologici raccolti regolarmente, questo studio ha caratterizzato il tumore al seno con un secondo carcinoma polmonare primario (BC-pLC) e ha esaminato i correlati di occorrenza...
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Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.
Non è stato ricevuto alcun finanziamento specifico da agenzie pubbliche, commerciali o senza scopo di lucro. Gli autori ringraziano i Dipartimenti di Patologia e Chirurgia Cardiotoracica per l'assistenza nella valutazione dei casi e nella revisione delle vetrine.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Copertine | Fisher Scientific | 12?545?10 | Utilizzato per coprire le sezioni di tessuto colorato per la microscopia |
| Cromogeno DAB | Thermo Fisher Scientific | K346711 | Utilizzato per lo sviluppo del colore in immunoistochimica |
| Anticorpo del recettore degli estrogeni (RE) | Thermo Fisher Scientific | MA1?10066 | Anticorpo monoclonale per la rilevazione della proteina RE RRID: AB_2252608 |
| Fluorescenza dentro? Kit di ibridazione Situ (FISH) | Abbott | 32?10030 | Per studi di amplificazione HER2 confermativi |
| Formalina (4% Neutrale Bufferizzato) | Neomarkers, USA | – | Per la fissazione tissutale negli studi istopatologici |
| Anticorpo HER2 | Dako / Agilent | A0485 | Anticorpo monoclonale per il rilevamento della proteina HER2 RRID: AB_2252608 |
| Kit di colorazione per immunoistochimica | Neomarkers, USA | – | Per l'esecuzione di sagaggi IHC su campioni tumorali |
| Anticorpo Ki67 | Dako / Agilent | M7240 | Anticorpo monoclonale per la rilevazione della proteina Ki67 RRID: AB_2341197 |
| Microtomo | Leica | RM2255 | Per la sezionazione di campioni di tessuto incorporato |
| Media di montaggio | Sigma? Aldrich | M2681 | Utilizzato per il montaggio di sezioni di tessuto su vetrine |
| Paraffina | Sigma-Aldrich | P?6001 | Utilizzato per l'inserimento dei tessuti in istologia |
| Anticorpi del recettore del progesterone (PR) | Thermo Fisher Scientific | MA1?10176 | Anticorpo monoclonale per la rilevazione della proteina PR |
| SPSS v23.0 |
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