Preparazione di organoidi dai tumori: un modello tumorale in vitro 3D

0 visualizzazioni • 3:17 min. • April 30th, 2023

Tritare il tessuto tumorale in piccoli pezzi. Trasferire i pezzi in una provetta con tampone per la digestione. Le fibre di collagene che circondano le cellule vengono scomposte, degradando la matrice del tessuto. Quindi, pellettare i pezzi digeriti e scartare la maggior parte del tampone di digestione. Muovi il tubo per rompere il pellet.

La soluzione è ora costituita da grumi cellulari di varie dimensioni. Risospendere i grumi cellulari in una soluzione di tripsina e un inibitore ROCK. La tripsina continua a scomporre il tumore e l'inibitore previene la morte cellulare. A intervalli regolari, pipettare la soluzione per rompere i grumi e disperdere le cellule. Quindi, risospendere le cellule in soluzione di matrice alla concentrazione appropriata.

Mettere le gocce della soluzione in una piastra di coltura per formare cupole a matrice. Posizionare le piastre capovolte in un'incubatrice e lasciare che la matrice si solidifichi completamente. Quindi, aggiungere i terreni di coltura cellulare e incubare, con il lato destro rivolto verso l'alto. La matrice fornisce un'impalcatura per supportare la crescita tridimensionale dell'organoide.

Dopo la macinazione, metti i pezzi di tumore in

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