drosofila Saggio di scavo e tunneling: un metodo per valutare l'ipossia tissutale nelle larve di mosca

- Per allestire la gabbia di raccolta degli embrioni, utilizzare piastre di agar per succo d'uva integrate con pasta di lievito fresco e posizionare le piastre su gabbie contenenti mosche Drosophila maschio e femmina del genotipo appropriato. L'odore del lievito e del succo d'uva è attraente e favorisce la deposizione delle uova da parte delle femmine. Lasciare deporre le uova per un periodo di tempo. Quindi rimuovere gli adulti e incubare le piastre embrionali per 24 ore per ottenere le larve di primo stadio. Quindi trasferisci delicatamente alcune singole larve dalla piastra del succo d'uva su una piastra di prova di solo agar dove è stato ritagliato un foro nell'agar al centro della piastra e riempito con pasta di lievito.

Le giovani larve devono nutrirsi per aumentare il peso corporeo per svilupparsi, quindi scavano nella fonte di cibo, la pasta di lievito. Man mano che si sviluppano, le larve entrano in una fase di vagabondaggio e si allontanano dal cibo per cercare un sito per l'impupamento. Per valutare l'ipossia, esaminare i modelli di tunneling che le larve formano nel substrato. La mancanza o l'insufficienza del tunneling è un segno di privazione di ossigeno. Nel protocol