0 visualizzazioni • 2:23 min. • April 30th, 2023
- Per isolare le ovaie dalle mosche vive di Drosophila, iniziare spostando una femmina anestetizzata in uno dei tre pozzetti di dissezione riempiti con terreno di dissezione per insetti preriscaldato. Il terreno aiuterà a mantenere l'integrità e la vitalità dei tessuti.
Sotto un microscopio da dissezione, separare l'addome dal torace. Quindi, sposta l'addome in un nuovo pozzo. Per isolare le ovaie, tenere l'addome all'estremità posteriore e raschiare accuratamente gli organi riproduttivi. Infine, trasferisci le ovaie in un pozzetto fresco. Dopo questo passaggio, è possibile utilizzare l'intera ovaia o sezionarla ulteriormente nelle strutture che la compongono.
Ogni ovaio di Drosophila è composto da diversi ovarioli, costituiti da una catena di camere uovo con livelli crescenti di maturità. Per liberare gli ovarioli, fissare l'ovaio all'estremità posteriore opaca e stuzzicare con cura la guaina protettiva intorno all'ovaio fino a quando gli ovarioli non sono separati correttamente.
Nel protocollo di esempio, mostreremo la dissezione delle ovaie di Drosophila per il loro utilizzo nella microscopia tissutale viva e fissa.
- Dopo aver selezionato cinque mosche femmine anestetizzate secondo il protocollo di testo, al microscopio da dissezione, utilizzare due paia di pinze per recidere il torace dall'addome. Quindi, trasferire con cura gli addomi nel secondo pozzetto del piatto. Usando un paio di pinze per tenere l'addome all'estremità posteriore, usa l'altro paio di pinze per spingere lentamente le ovaie verso l'esterno.
Quindi, usa la pinza per tenere una singola ovaia per l'estremità posteriore opaca e spostala con cautela sul terzo pozzetto del piatto per stuzzicarla o fissarla. Stuzzica con cura la guaina protettiva intorno alle ovaie usando un paio di pinze per tenere l'estremità posteriore e spazzando leggermente un ago stuzzicante dalla parte posteriore a quella anteriore.