Essiccazione chimica: preparazione di campioni biologici per microscopia elettronica a scansione (SEM)

- Per iniziare, iniziare disidratando ed essiccando un campione fisso per ridurre la distorsione del campione causata dalla rimozione di gas e acqua liquida alla pressione operativa ridotta dei microscopi elettronici a scansione convenzionali, SEM.

Per disidratare il campione, lavarlo con concentrazioni crescenti di etanolo in acqua fino a raggiungere il 100% di etanolo. Quindi ripetere questo processo con un agente essiccante chimico in etanolo fino a quando il campione non viene lavato con un agente essiccante puro. Trasferire il campione e l'agente essiccante in una capsula di evaporazione. Coprirlo con una quantità minima di essiccante aggiuntivo e lasciarlo asciugare in una cappa aspirante per una notte.

Quindi, montare il campione preparato sulla parte superiore di un tronchetto del microscopio utilizzando del nastro adesivo al carbonio. Infine, applica la vernice d'argento ai bordi dello stub, quindi dal bordo dello stub a ciascuno dei campioni, per ridurre l'accumulo di elettroni in eccesso, che potrebbero causare artefatti indesiderati dell'immagine.

In questo esperimento, i moscerini della frutta, Drosophila melanogaster, vengono preparati per l'analisi SEM utilizzando l'