Inclusione di teste di Drosophila adulta in paraffina: preparazione del tessuto per l'istologia

- Per immobilizzare le mosche per l'inclusione della paraffina, spingere con cautela la Drosophila anestetizzata attraverso la fessura di un collare antimosche in modo che le loro teste siano posizionate uniformemente sulla parte superiore del dispositivo mentre sono ancora attaccate al resto del corpo. Per il fissaggio dei tessuti, posizionare i collari nella soluzione di Carnoy. Quello di Carnoy è un agente di fissazione denaturante costituito da etanolo, cloroformio e acido acetico.

Per preparare il campione per l'infiltrazione di paraffina, disidratare il tessuto trasferendo il colletto attraverso concentrazioni graduate di etanolo. Quindi, trasferire il collare nel metilbenzoato, un solvente organico. Quindi, mettilo in una soluzione di metil benozoato e paraffina fusa mentre viene riscaldato per assicurarti che la paraffina rimanga sciolta. Procedere a un'elaborata serie di fasi di lavaggio con la sola paraffina preriscaldata per rimuovere il metilbenzoato.

Successivamente, posizionare rapidamente il collare in uno stampo e versare la paraffina fusa fino a coprirlo completamente. Una volta che la paraffina si è indurita, rimuovere il blocco dallo stampo e utilizzare una lama