Saggio delle preferenze gustative: un metodo per misurare il comportamento alimentare in Drosophila

0 views • 3:45 min • April 30th, 2023

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- Per eseguire il test delle preferenze gustative, utilizzare una camera, ad esempio una piastra di Petri divisa in sezioni uguali. Se si misura la scelta tra due soluzioni di gusti diversi, etichettarne una in rosso e l'altra in blu utilizzando coloranti alimentari insapore. Quindi posizionare gocce equidistanti di ciascuna soluzione lungo il bordo del piatto attraverso sezioni alternate.

Aggiungete ora le mosche anestetizzate e precedentemente affamate al centro della camera e coprite il piatto. Esegui l'esperimento al buio per escludere potenziali distorsioni di colore e incuba a 25 gradi Celsius per un determinato periodo di tempo. Quando viene data la possibilità di scegliere tra due soluzioni, più soggetti preferiscono consumare soluzioni il cui sapore è più attraente, ad esempio il dolce, evitando opzioni avverse come le soluzioni amare. Ferma l'esperimento spostando la camera in un congelatore.

Per misurare il comportamento alimentare e le preferenze di gusto, confronta il numero di mosche con addomi di colore diverso. Nel protocollo di esempio, vedremo una dimostrazione del saggio delle preferenze gustative che misura la scelta tra varie soluzioni di saccarosio.

- Per iniziare l'esperimento, saturare un batuffolo di cotone con acqua sul fondo di una fiala di mosca standard. Quindi, raccogli le mosche in gruppi di 100 animali su un tampone di CO2, quindi aggiungi le mosche in una fiala preparata. Utilizzare un batuffolo di cotone per fissare le fiale chiuse. Quindi, posizionare le fiale su un lato in un'incubatrice ecologicamente controllata. Preparare il gusto di controllo di 1 millimolare di saccarosio combinando 10 microlitri di soluzione di saccarosio 100 millimolare, 13 microlitri di colorante alimentare rosso e 977 microlitri di acqua.

Successivamente, preparare il tastant sperimentale di saccarosio da 5 millimolari. Quindi, creare le camere di saggio ottenendo una piastra di Petri di plastica da 100 millimetri per 15 millimetri e posizionando tre gocce da 10 microlitri di tastant di controllo il più vicino possibile al bordo della piastra a ore 12. A ore 3, posizionare tre gocce da 10 microlitri di tastant sperimentale il più vicino possibile al bordo della piastra. Posizionare altre tre gocce di tastatore di controllo a ore 6. Quindi posizionare altre tre gocce del tastant sperimentale a ore 9.

Quindi, svuota una fiala di 100 mosche affamate su un tampone di CO2 giusto il tempo di anestetizzare tutti gli animali. Spennellare gli animali al centro di una camera di analisi preparata e coprirla con il coperchio del piatto. Posizionare la camera di analisi in una scatola di cartone opaca. Quindi etichettare l'esterno della scatola con la condizione e il genotipo da testare. Sposta l'intera configurazione in un'incubatrice. Dopo due ore, posizionare le camere di analisi, ancora contenute all'interno di scatole di cartone, direttamente in un congelatore a 20 gradi Celsius negativi fino a quando non sono pronte per la quantificazione.

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Last updated: 18 July 2026