Preparazione del filetto larvale: un metodo per visualizzare i neuroni sensoriali intatti e le cellule epidermiche associate

- Per orientare una larva per la dissezione del filetto, posizionarla in un piatto rivestito di silicone contenente soluzione salina fredda e identificarne i lati dorsale e ventrale. I tubi tracheali che corrono lungo la sua lunghezza segnano il lato dorsale, mentre le cinture dei denticoli addominali identificano il lato ventrale.

Quindi, con il lato ventrale rivolto verso l'alto, allungare delicatamente la larva e appuntare ciascuna estremità sul fondo del piatto. Questa posizione manterrà intatti i gruppi dorsali di neuroni sensoriali multi-dendritici e le cellule epidermiche associate mentre la dissezione procede.

Usa le forbici da dissezione per tagliare lungo la linea mediana ventrale della larva. Appunta la cuticola alla piastra per appiattire la preparazione e rimuovere le strutture interne per rivelare il tessuto muscolare sottostante. Quindi, rimuovere con cura il muscolo appropriato per esporre l'epidermide e ottenere l'accesso ai neuroni precedentemente oscurati preservando la loro morfologia dendritica.

Nel protocollo di esempio, vedremo una dimostrazione dettagliata della preparazione del filetto larvale e della rimozione muscolare per visualizzare i neuroni sensorial