drosofila Saggio di aggressione: un metodo per testare la plasticità comportamentale nelle mosche
Trascrizione
- Per valutare l'aggressività nelle mosche, utilizzare una camera di combattimento chiusa dotata di due punti di ingresso e un divisorio per tenere separati i soggetti prima della prova. Posiziona una fonte di cibo al centro della camera per creare conflitto per le mosche. Quindi, caricare i maschi precedentemente isolati e contrassegnati attraverso i punti di ingresso su entrambi i lati dell'arena. Rimuovi il divisore e registra gli incontri delle mosche per quantificare l'aggressività.
Per stabilire il dominio, un maschio mostra comportamenti offensivi stereotipati che aumentano di intensità, dall'avvicinarsi e inseguire l'avversario all'affondo, un comportamento che indica aggressività, in cui la mosca attaccante si alza in alto sulle zampe posteriori e scatta sull'avversario nel tentativo di afferrarlo. Al contrario, l'avversario mostra comportamenti difensivi, come scappare in ritirata dall'aggressore. Così, un perdente e un vincitore emergono dal combattimento, e in ogni avversario si forma un ricordo della sconfitta o della vittoria.
Nel protocollo di esempio, vedremo come una configurazione che elimina la manipolazione degli animali durante il test di aggressività viene utilizzata per studiare la formazione della memoria nei moscerini che hanno perso il loro primo combattimento, chiamato effetto "perdente".
- Inizia gli esperimenti comportamentali inserendo divisori di plastica in ogni camera di combattimento. Rimuovere il tappo di cotone dal tubo di isolamento e posizionare il tubo sotto un foro aperto sul lato dell'apparecchio. Consenti alla mosca di entrare nella camera di combattimento con la geotassia negativa. Quindi, chiudere la parete scorrevole dopo che la mosca è entrata nella camera. Ripetere la procedura per introdurre la seconda mosca nella camera di combattimento sull'altro lato dell'apparecchio.
Quindi, riposizionare l'apparecchio nella posizione di videoregistrazione illuminata. Inizia la registrazione video e rimuovi il divisorio di plastica per consentire alle mosche di interagire. Per gli esperimenti con l'effetto "perdente", registra i primi combattimenti per 20 minuti per garantire la formazione di forti relazioni di dominanza. Dopo 20 minuti, riposizionare delicatamente il divisorio di plastica nelle camere di combattimento per separare le mosche e interrompere il video.
- Per indurre una forte mentalità da "perdente", assicurarsi che le mosche stabiliscano e mantengano una relazione di dominanza durante i primi combattimenti, e poi ridurre al minimo il disturbo degli animali quando si inseriscono i divisori per separare le mosche.
- Dopo un periodo di riposo di 10 minuti, inizia a registrare e rimuovi delicatamente il divisorio di plastica. Lascia che le mosche interagiscano per altri 20 minuti. Interrompi la registrazione dopo 20 minuti. Per concludere l'esperimento, rimuovere le mosche dalle camere comportamentali mediante geotassi negativa invertendo la procedura descritta in precedenza.
