Saggio con sonda termica locale: un metodo per valutare la nocicezione delle alte temperature nelle larve di Drosophila

- Per preparare le larve di Drosophila per un test con sonda termica, raccogliere gli animali dello stadio di sviluppo desiderato e trasferire le singole larve su una piastra di prova con un sottile film d'acqua. L'acqua permette alle larve di muoversi liberamente senza attaccarsi alla superficie della piastra.

Le larve di Drosophila rilevano stimoli termici nocivi attraverso neuroni sensoriali multidendritici nella loro epidermide, noti come nocicettori. Questi non si attivano fino a quando non viene raggiunta una certa soglia sensoriale, come le alte temperature potenzialmente dannose.

Impostare la sonda termica su una temperatura che superi questa soglia sensoriale e provochi l'accensione dei nocicettori. Premere delicatamente la punta della sonda contro la larva per applicare il calore. La larva risponderà alla temperatura nociva con comportamenti termo-nocicettivi, ritirandosi dalla sonda. Fermati quando la larva mostra un ruolo a 360 gradi lontano dalla sonda di calore, o quando è trascorso un tempo definito. Registrare il tempo di risposta.

Nel protocollo di esempio, vedremo una dimostrazione di un saggio con sonda termica localizzata su larve di Drosophila all'inizio del te