0 visualizzazioni • 2:40 min. • April 30th, 2023
- Per testare la preferenza di una mosca femmina per la deposizione delle uova o i siti di ovideposizione, fornire a una singola mosca femmina la scelta tra due diversi substrati su cui depositare le sue uova all'interno di una camera di prova. La mosca confronterà le opzioni disponibili e sceglierà i siti che preferisce, di solito il substrato più adatto per la sua prole.
Assicurati che la mosca sia pronta a deporre molte uova, in modo che ci sia un numero robusto di uova in ogni prova. Alla fine dell'esperimento, rimuovere la mosca e contare le uova su ciascun substrato per determinare la preferenza di ovideposizione della mosca.
Nel protocollo di esempio, utilizzeremo un saggio ad alto rendimento per testare la preferenza di deposizione delle uova per substrati di agarosio semplici o contenenti saccarosio.
- Continuare con l'esperimento ottenendo camere di deposizione delle uova in acrilico precedentemente costruite. Inserire dei fogli di plastica nella parte superiore, caricando un pezzo della camera che funga da superficie inferiore.
Quindi, anestetizza le femmine su un tampone di anidride carbonica e caricale singolarmente in ogni arena per la deposizione delle uova. Lasciare che le mosche abbiano 30 minuti per riprendersi dall'anidride carbonica e acclimatarsi al nuovo ambiente. Mentre le mosche si regolano, riempire un tubo con agarosio fino a 10 millilitri. Quindi, preparare un substrato di saccarosio da 150 millimolari inserendo 750 microlitri di soluzione di saccarosio 2 molari nel tubo. Conservare una bottiglia di agarosio sciolto all'1% a bagnomaria.
Preparare il substrato semplice allo stesso modo, ma sostituire la soluzione di saccarosio con acqua distillata. Quindi, ottenere il pezzo di substrato della camera e pipettare 1.000 microlitri di substrato di agarosio in ogni trogolo. Mettere da parte l'agarosio a solidificare per 30 minuti.
Una volta che i substrati di agarosio e le mosche sono pronti, assemblare tutti e tre i pezzi della camera di deposizione delle uova e poi estrarre i fogli di plastica. Posizionare le camere nelle incubatrici a mosca durante la notte.
Anestetizzare le femmine iniettando anidride carbonica nella camera. Smontare la camera e gettare le mosche anestetizzate. Infine, scatta delle foto delle uova per tenerne traccia.