Saggio di assuefazione al tocco: un metodo per studiare l'apprendimento non associativo in C. elegans

0 visualizzazioni2:37 min • April 30th, 2023

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- C. elegans si muove su un fianco generando onde sinusoidali lungo il suo corpo. L'animale si muove in avanti quando le onde si propagano dalla testa alla coda. Al contrario, quando le onde sinusoidali si propagano dalla coda alla testa, il verme si muove all'indietro.

La locomozione all'indietro, nota come inversione, è breve e si verifica spontaneamente o è innescata da uno stimolo sensoriale, ad esempio un tocco delicato sulla parte anteriore del verme. Per eseguire il test di assuefazione al tatto anteriore, isolare i vermi precedentemente sincronizzati dello stadio di sviluppo desiderato su piastre NGM non seminate.

Utilizzando un pelo fine sterilizzato, eseguire un tocco delicato sulla parte anteriore del corpo. Ciò susciterà una risposta di fuga in cui il worm esegue un'inversione. Attendi un intervallo interstimolante di 10 secondi affinché il verme si riprenda e ripeti il tocco. Per valutare l'assuefazione, che è una forma di apprendimento non associativo, registrare il numero di tocchi fino a quando non si osserva più un'inversione.

Nel protocollo di esempio, vedremo una dimostrazione del test di assuefazione al tatto anteriore.

- In primo luogo, l'uso di plettro in filo di platino calibro 30 sterilizzato al fuoco per trasferire circa 10 giovani vermi adulti sincronizzati su nuove piastre NGM non seminate. Lasciare i vermi indisturbati per cinque minuti per dare loro il tempo di acclimatarsi al nuovo piatto. Quindi, sterilizza un pelo del sopracciglio attaccato all'estremità di uno spiedino di legno o di uno stuzzicadenti immergendolo in etanolo al 70%.

Pulire con un fazzoletto pulito e privo di lanugine e attendere un minuto affinché l'etanolo evapori. Tocca delicatamente il verme sulla testa usando i peli delle sopracciglia. Ripeti i tocchi lasciando passare 10 secondi tra i tocchi per consentire al verme di riprendersi.

Continuare a toccare consentendo intervalli di interstimolo di 10 secondi fino a quando il verme non si muove più all'indietro. Registra il numero di tocchi necessari affinché si verifichi questa assuefazione.

- Consentire un intervallo di 10 secondi tra i tocchi è importante, in quanto ciò consente all'animale di recuperare il tempo e aiuta a ottenere test coerenti sul comportamento di assuefazione.

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Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026