Ferita laser epidermica: induzione di danni localizzati per esaminare i processi di riparazione in C. elegans

- Per iniziare, trasferisci i giovani vermi adulti su un tampone di agarosio fresco su un vetrino. Quindi aggiungere alcune gocce di soluzione di levamisolo da 12 millimolari per paralizzare i vermi. Coprite i vermi con un vetrino coprioggetti e aspettate qualche minuto. Posizionare il vetrino sotto un microscopio confocale a disco rotante e mettere a fuoco la superficie laterale più esterna del verme.

L'epidermide di un verme adulto è una sottile struttura a strato singolo costituita da sincizi multinucleati che derivano da eventi di fusione cellulare. La superficie apicale dell'epidermide secerne una cuticola collagenica flessibile, mentre la superficie basale è ricoperta da un sottile strato di matrice extracellulare chiamato lamina basale.

Successivamente, avvolgere la superficie apicale dell'epidermide con un laser. Il citoplasma dalle cellule danneggiate può fuoriuscire, apparendo come una bolla nel sito della ferita.

L'irradiazione laser ha un vantaggio rispetto ad altre tecniche, come l'avvolgimento dell'ago, in quanto provoca una rottura localizzata della cuticola e delle cellule epidermiche, senza danneggiare i tessuti interni. Nel protocollo di esempio, vedremo il proces