Digestione enzimatica tumorale: una procedura per generare una sospensione di cellule tumorali da modelli murini di cancro xenotrapianto derivati da pazienti

- I modelli di xenotrapianto derivati da pazienti, o PDX, sono modelli animali sperimentali che portano cellule tumorali o frammenti tumorali impiantati direttamente da un paziente umano. Questi modelli simulano il microambiente del tessuto tumorale umano, consentendo la propagazione del tumore. Per generare sospensioni di cellule tumorali, in primo luogo, prelevare la porzione tumorale derivata dal paziente dal topo ricevente.

Tritare i segmenti tumorali per ottenere frammenti più piccoli. Trattare i frammenti con una soluzione digestiva contenente un cocktail di collagenasi, ialuronidasi ed enzimi desossiribonucleasi. La collagenasi e gli enzimi ialuronidasi digeriscono la matrice extracellulare che tiene insieme il tessuto, facilitando il rilascio delle singole cellule nella sospensione.

La desossiribonucleasi degrada il DNA libero rilasciato dalle cellule lisate. A questo punto, filtrare il campione digerito attraverso filtri cellulari per rimuovere il tessuto non digerito e i detriti e ottenere sospensioni a cellula singola. Centrifugare per separare le celle. Scartare il surnatante contenente la miscela di digestione e risospendere il pellet cellulare in un terreno fresco.

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