Tumore del colon-retto

Questo video descrive la procedura per ottenere la sospensione di cellule tumorali da xenotrapianto derivato da pazienti o modelli murini di cancro PDX. I modelli di piccoli animali forniscono una piattaforma rapida, riproducibile e adattabile per studiare la progressione del tumore e i diversi modelli metastatici.

Il video descrive la dissezione laser del modello 3D di co-coltura organotipica con precisione a livello di micron. Nei modelli organotipici 3D, i costituenti stromali come i fibroblasti sono co-coltivati tridimensionalmente con cellule epiteliali tumorali. Il modello 3D funge da strumento sperimentale che consente di studiare l'invasione e le interazioni cancro-stroma in condizioni quasi fisiologiche.

Questo video descrive la tecnica di studio del citoscheletro e delle aderenze focali nelle cellule primarie di cancro del colon umano per comprenderne le variazioni a seconda della rigidità del substrato. Questa coltura di cellule tumorali su substrati morbidi e duri consente varie misurazioni biofisiche a valle per la prognosi del cancro.

Gli sferoidi sono un tipo di modello di coltura cellulare 3D utilizzato per rappresentare in modo più accurato l'ambiente di una cellula rispetto ai modelli monostrato di coltura cellulare 2D. Nel protocollo di esempio, vedremo gli scienziati generare sferoidi da una linea cellulare di cancro del colon-retto e applicare l'imaging di cellule vive per monitorare la crescita degli sferoidi.

Questo video descrive il test di legame dei microtubuli utilizzato per separare la proteina tau legante i microtubuli dalle frazioni proteiche tau iperfosforilate non leganti nelle cellule tumorali del colon-retto. Questo test aiuta a determinare l'effetto di varie sostanze chimiche che possono alterare lo stato di fosforilazione della proteina tau, influenzando il suo legame con i microtubuli.

Questo video descrive il protocollo dettagliato per la generazione di organoidi 3D da cellule tumorali del colon-retto derivate da modelli murini propagandoli su piastre artificiali rivestite di matrice extracellulare. Questi organoidi CRC possono essere utilizzati come modello per studiare la crescita primaria delle cellule tumorali umane e le metastasi.

Questo video descrive il test di microscopia della forza di trazione. Il test determina la trazione cellulare delle cellule tumorali del colon umano sulla matrice extracellulare presente su idrogel elastico morbido con perle fluorescenti incorporate. Lo spostamento risultante delle perle fluorescenti viene misurato utilizzando un software appropriato.

Questo video descrive un protocollo dettagliato per isolare le cellule tumorali circolanti dal campione di sangue intero di un modello murino di tumore colorettale soppresso. Queste CTC isolate possono essere coltivate e utilizzate per l'analisi a valle prevista.

Questo video descrive la tecnica di generazione di organoidi CRC trasdotti da particelle lentivirali GFP per consentire l'imaging fluorescente. Questi organoidi marcati con GFP, quando inseriti in modelli animali, aiutano a studiare l'invasione e le metastasi tumorali.

Questo video descrive l'estrazione di microRNA circolanti da campioni di plasma di pazienti con cancro del colon-retto utilizzando l'estrazione organica seguita dall'arricchimento della colonna in fibra di vetro. I miRNA sono stabili nei fluidi biologici come il siero e il plasma, il che li rende biomarcatori circolanti ideali per la diagnosi del cancro, la prognosi e il processo decisionale e il monitoraggio del trattamento. Questo metodo aiuterà a identificare nuovi biomarcatori circolanti in...

Questo video descrive il protocollo per la rilevazione delle specie reattive dell'ossigeno (ROS) cellulari totali utilizzando il diacetato di 2',7'-diclorodiidrofluoresceina (DCFH-DA). Questo metodo aiuta a visualizzare la localizzazione dei ROS nelle cellule aderenti utilizzando un microscopio a fluorescenza e a quantificare ulteriormente l'intensità dei ROS con un lettore di piastre a fluorescenza.

Questo video descrive un protocollo per rilevare focolai di riparazione del DNA indotti da radiazioni nelle linee cellulari di cancro del colon utilizzando la colorazione in immunofluorescenza. Le proteine di riparazione del DNA si attivano nel sito di danno al DNA; Pertanto, possiamo rilevarli utilizzando anticorpi specifici e visualizzarli al microscopio a fluorescenza.

Questo video descrive il protocollo di isolamento del DNA da campioni di feci di topi portatori di tumore al colon. Il DNA estratto viene amplificato mediante PCR e il prodotto viene ulteriormente pulito utilizzando un approccio basato su microsfere magnetiche. Questo metodo può essere utilizzato per determinare l'effetto dell'arricchimento ambientale sul microbiota del colon e sulla mortalità animale.

Questo video descrive un protocollo per valutare lo stato di fosforilazione della proteina tau mediante un test della fosfatasi nelle cellule tumorali del colon-retto. L'enzima fosfatasi agisce sui gruppi fosfato presenti sulla proteina tau, aumentando la mobilità della proteina tau sul gel SDS PAGE rispetto ai campioni di proteina tau non trattati.

Il video descrive la tecnica per l'iniezione intracecale di cellule cancerose per sviluppare un modello murino ortotopico con tumori altamente uniformi. Pertanto, il modello murino ortotopico consente una simulazione realistica delle metastasi, fornendo uno strumento prezioso per studiare i cambiamenti fenotipici durante la crescita e la disseminazione del tumore.

Questo video descrive la generazione di un modello murino colorettale mediante infezione segmentale da adeno-cre. Il segmento del colon infetto porta alla tumorigenesi all'interno di questo segmento della mucosa, con conseguente progressione degli adenomi in carcinoma invasivo e metastatico. Questo modello è una piattaforma interessante per studi di biologia del cancro e studi terapeutici preclinici.

Questo video descrive la tecnica della radioimmunoterapia premirata o PRIT, in cui vengono somministrati immunoconiugati seguiti da radioligandi per il trattamento dei tumori. Questa radioimmunoterapia riduce le dosi di radiazioni ai tessuti sani e utilizza radionuclidi con emivite molto basse incompatibili con vettori basati su anticorpi.

Questo video descrive il protocollo per la generazione di metastasi da parte degli organoidi CRC derivati da PDX marcati con lentivirus GFP nella milza di un topo immunodeficiente. Le micrometastasi tumorali che colonizzano altri organi possono essere rilevate utilizzando un microscopio a fluorescenza per valutare l'espressione di GFP.

Questo video descrive il protocollo per stabilire un modello murino di metastasi spontanee di xenotrapianti derivati da pazienti con cancro del colon-retto o PDX. Questi modelli di xenotrapianto imitano parzialmente le caratteristiche dei carcinomi umani e comprendono gli aspetti critici delle neoplasie maligne umane, tra cui l'invasione e le metastasi.

Questo video descrive il protocollo dettagliato per la resezione intestinale in un modello murino. Questa tecnica fornisce informazioni sul malassorbimento, il sovraaccumulo e la tossicità biliare indotti dall'ileectomia nell'intestino del topo.

Questo video descrive il protocollo per la generazione di un modello murino di cancro colorettale xenotrapianto ortotopico derivato da paziente per studiare la progressione delle cellule tumorali del colon-retto in topi diabetici/immunodeficienza combinata grave (NOD/SCID) non obesi. Questo modello murino aiuta a comprendere la crescita del tumore primario e il modello di metastasi.