Stabilire un modello murino sperimentale di metastasi: impianto di cellule organoidi CRC che esprimono GFP nel modello PDX per rilevare le micrometastasi

- Le micrometastasi sono un piccolo gruppo di cellule tumorali che si liberano da un tumore primario e si diffondono in diverse parti del corpo attraverso il sangue o i linfonodi. Per rilevare le micrometastasi, sospendere le cellule organoidi del cancro del colon-retto in PBS per mantenere il pH e caricare la sospensione cellulare in una siringa. Quindi, posizionare un topo anestetizzato in posizione prona su un lettino chirurgico. Praticare una piccola incisione con le forbici sulla parte inferiore del fianco sinistro ed esporre la milza. Estrarre delicatamente la milza usando una pinzetta e iniettare lentamente la sospensione cellulare nella milza. Chiudere l'incisione con punti di sutura e riportare l'animale nella sua gabbia. Monitoralo fino a quando non si riprende.

Dopo il periodo di iniezione desiderato, sacrificare il topo per sezionare i tumori primari e i diversi tessuti. Osservare i tessuti sezionati al microscopio a fluorescenza. Le cellule tumorali che esprimono GFP sviluppano un tumore primario nel sito iniettato nella milza. Alcune cellule tumorali del tumore primario si spostano in un organo diverso, di solito il fegato, per formare colonie micrometastatiche. Nel s