JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:23 min • March 4th, 2025
Prendi sezioni di cervello fissate chimicamente e incluse in paraffina da un ratto con infarto cerebrale, dove il flusso sanguigno limitato provoca la morte cellulare nella regione interessata.
Immergere il fazzoletto nello xilene per sciogliere la paraffina.
Immergere il tessuto in alcol assoluto per rimuovere lo xilene residuo.
Idratare il tessuto facendolo passare attraverso concentrazioni di alcol decrescenti.
Sciacquare il fazzoletto con acqua per eliminare l'alcol residuo.
Applicare l'ematossilina, un colorante basico che si lega al DNA, colorando i nuclei di viola.
Sciacquare con acqua e alcol acido per rimuovere l'ematossilina in eccesso.
Risciacquare con una soluzione alcalina per rendere blu la colorazione nucleare.
Applicare eosina, un colorante acido che colora di rosa le proteine citoplasmatiche ed extracellulari della matrice extracellulare caricate positivamente.
Disidratare il tessuto utilizzando concentrazioni crescenti di alcol.
Immergere il tessuto nello xilene per pulirlo, quindi montarlo e visualizzarlo al microscopio.
Le aree di controllo appaiono rosa con nuclei blu, mentre le aree infartuate appaiono pallide a causa di una colorazione insufficiente causata dalla morte cellulare.