JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:24 min. • March 4th, 2025
Inizia con un vassoio di colorazione contenente sezioni fisse di tessuto cerebrale di topo che mostrano degenerazione neuronale.
Aggiungere acqua distillata doppia per lavare le sezioni.
Mettere le sezioni in una soluzione di nitrato d'argento e incubare.
Gli ioni d'argento si legano selettivamente ai neuroni degenerati.
Immergere le sezioni nell'acetone per disidratarle, quindi trattare con una soluzione alcalina d'argento per stabilizzare i depositi d'argento.
Incubare le sezioni in una soluzione di miscela riducente per convertire gli ioni d'argento legati in depositi d'argento metallico.
Sciacquare con acido acetico per fermare la reazione.
Questo evidenzia i neuroni degeneranti rispetto ai neuroni sani non colorati.
Metti le sezioni in un agente sbiancante delicato per eliminare l'argento di fondo, quindi risciacqua con acqua distillata doppia.
Quindi, immergere brevemente un agente sbiancante forte per rimuovere i depositi d'argento persistenti dallo sfondo.
Aggiungere un reagente stabilizzante per stabilizzare i depositi d'argento sui neuroni, quindi risciacquare con acqua distillata doppia. Infine, trattare con un fissativo per fissare definitivamente la macchia.
Le regioni colorate più scure indicano una degenerazione neuronale.