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Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:21 min • March 4th, 2025
Prelevare una sezione di tessuto cerebrale da un topo sottoposto a lieve ipoperfusione cerebrale cronica, o MCCH, e iniettato con peptidi di amiloide-beta.
La MCCH è caratterizzata da un ridotto flusso sanguigno al cervello. Ciò limita l'apporto di ossigeno e nutrienti allo strato di cellule endoteliali dei vasi sanguigni cerebrali, danneggiando le cellule.
Il danno aumenta la permeabilità della parete vascolare, consentendo ai peptidi di amiloide-beta iniettati di accumularsi nella parete e formare placche.
Lavare la sezione con un tampone per rimuovere i residui di sostanze chimiche.
Incubare con tioflavina S, un colorante fluorescente che si lega alle placche amiloidi.
Lavare la sezione macchiata con concentrazioni di alcol decrescenti per rimuovere eventuali coloranti non legati e reidratare il tessuto.
Posizionare la sezione nel tampone per mantenere l'idratazione.
Montare la sezione utilizzando un mezzo di montaggio che preservi l'intensità della fluorescenza del colorante.
Al microscopio a fluorescenza, esaminare la presenza di depositi di amiloide marcati in fluorescenza per confermare l'aggregazione di amiloide-beta indotta da MCCH.