Rilevamento dell'alfa-sinucleina fosforilata mediante Western blotting

0 visualizzazioni1:30 min • March 4th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Iniziamo con le proteine del liquido cerebrospinale, tra cui l'alfa-sinucleina fosforilata, un biomarcatore delle malattie neurodegenerative.

Aggiungere un tampone di caricamento contenente un detergente, un agente riducente e un colorante tracciante.

Riscaldare per denaturare le proteine, quindi caricarle in un gel SDS-PAGE.

Eseguire l'elettroforesi per separare le proteine in base al peso molecolare in bande distinte.

Incubare il gel in un tampone assorbente agitandolo.

Quindi, trasferire elettro-le bande proteiche dal gel alla membrana.

Trattare la membrana con un fissativo per trattenere la proteina sulla membrana, quindi lavare.

Incubare con una soluzione bloccante contenente anticorpi primari e inibitori della fosfatasi per mantenere la fosforilazione dell'alfa-sinucleina.

Gli anticorpi interagiscono esclusivamente con l'alfa-sinucleina fosforilata e i reagenti bloccanti bloccano i siti di interazione aspecifici, quindi lavano.

Introdurre anticorpi secondari coniugati con enzimi che interagiscono con gli anticorpi primari, quindi lavare.

Aggiungere un substrato chemiluminescente, interagendo con gli enzimi e generando una chemiluminescenza.

Una banda chemiluminescente conferma la presenza di alfa-sinucleina fosforilata.

12:01

Il rilevamento della malattia associata α-sinucleina da avanzato ELISA nel cervello di topi transgenici A53T umano Mutato α-sinucleina

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:27

Estrazione sequenziale di solubile e insolubile sinucleina alfa da Brains parkinsoniani

Video correlati

0 Visualizzazioni

08:33

Targeting Alpha Synuclein Aggregati in cutaneous periferici nervose fibre nervose da Pro(Enunciante autofluorescenza libera)

Video correlati

0 Visualizzazioni

01:25

Rilevamento di proteine tau fosforilate in campioni di cervello di topo mediante analisi Western Blot

Video correlati

0 Visualizzazioni

01:23

Rilevamento immunoistochimico di corpi di Lewy in una sezione di tessuto cerebrale umano malato

Video correlati

0 Visualizzazioni

04:09

Un test di immunofluorescenza per rilevare gli aggregati di alfa-sinucleina in una sezione di biopsia cutanea

Video correlati

0 Visualizzazioni

03:13

Studio dell'accumulo di alfa-sinucleina nei neuroni della dopamina embrionale primaria di topo

Video correlati

0 Visualizzazioni

04:37

Rilevamento della proteina associata alla malattia neurodegenerativa α-sinucleina mediante ELISA

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:36

Ricombinante da α-β e γ Synucleins stimolare attività di subunità catalitica della proteina fosfatasi 2A nelle analisi gratuita delle cellule

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:16

Somministrazione esogena di microsomi-collegato dell'alfa-synuclein aggregati di neuroni primari come un modello potente delle cellule di formazione di fibrille

Video correlati

0 Visualizzazioni

Ultimo aggiornamento: 15 agosto 2026