JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:20 min • March 4th, 2025
Prendi le cellule staminali neurali o NSC e le cellule endoteliali microvascolari cerebrali o BMEC nel rapporto desiderato.
Sospendere la miscela cellulare in una matrice extracellulare o in una soluzione ECM.
Stendere il composto sul fondo di un piatto confocale e incubare.
La ECM polimerizza, formando un'impalcatura tridimensionale che consente l'adesione cellulare.
Stendere uno strato di NSC nella soluzione ECM sullo strato solidificato.
Incubare per polimerizzare la ECM. Questo imita il tessuto cerebrale stratificato, migliorando le interazioni cellula-cellula.
Aggiungere il terreno e incubare.
I fattori di crescita nei mezzi promuovono la proliferazione cellulare facilitando al contempo l'organizzazione dei BMEC in reti di tipo vascolare, formando un'unità neurovascolare o NVU.
Sostituire i terreni con terreni contenenti vitamina A, facilitando la differenziazione delle NSC in neuroni e cellule gliali.
Le cellule all'interno della NVU sono assemblate spontaneamente in un'organizzazione modulare che replica un microambiente simile al cervello.