Analisi al microscopio elettronico del danno assonale nel nervo ottico di topi con lesione cerebrale

0 views • 1:27 min • March 4th, 2025

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Isolare il nervo ottico da topi transgenici con lesioni cerebrali a intervalli definiti dopo l'infortunio. Il nervo contiene neuroni che esprimono una proteina fluorescente.

Utilizzando la microscopia a fluorescenza, visualizzare il nervo danneggiato, che mostra un progressivo aumento dei gonfiori e delle disconnessioni assonali.

Fissare il tessuto per preservare le strutture cellulari.

Risciacquare il fazzoletto per rimuovere il fissativo in eccesso.

Trattare con una soluzione di osmio-ferrocianuro che si lega ai lipidi della guaina mielinica e migliora il contrasto per l'imaging.

Sciacquare il tessuto, quindi incubare in un composto di metalli pesanti che si lega alle macromolecole e migliora il contrasto.

Disidratare il tessuto utilizzando concentrazioni crescenti di alcol e immergerlo in una resina.

Ottenere sezioni trasversali e longitudinali e trattarle con composti di metalli pesanti, migliorando il contrasto.

Al microscopio elettronico, le sezioni longitudinali rivelano uno sviluppo progressivo di gonfiori assonali con mitocondri rigonfi accumulati, vescicole, blebbing della membrana e strutture citoscheletriche interrotte.

Le sezioni trasversali mostrano una progressiva rottura delle guaine mieliniche, indicando una degenerazione assonale.

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Last updated: 25 July 2026