JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 1:21 min • May 30th, 2025
Prendi una sezione fissa di tessuto cerebrale corticale di topo che mostra assoni e dendriti neuronali. I dendriti possiedono sporgenze, note come spine dendritiche, che formano sinapsi con gli assoni.
Incubare il tessuto con osmio-ferrocianuro, che si lega ai lipidi, seguito da un'altra applicazione di osmio, che migliora il contrasto strutturale per l'imaging.
Colorare con un composto di metalli pesanti che si lega alle macromolecole e migliora il contrasto.
Disidratare utilizzando concentrazioni crescenti di alcol per l'inclusione della resina.
Incorporare il tessuto nella resina, montarlo su un supporto e rivestirlo con l'oro per ottimizzare la qualità dell'imaging.
Utilizza la microscopia elettronica a scansione a fascio ionico focalizzato per l'imaging tridimensionale.
Utilizzare un fascio di ioni per rimuovere un sottile strato di tessuto incorporato nella resina, esponendo una superficie di imaging.
Focalizza un fascio di elettroni sulla superficie esposta e rileva gli elettroni retrodiffusi per generare un'immagine.
Esegui lo slicing seriale e l'imaging e ricostruisci un'immagine tridimensionale, rivelando una rete neuronale corticale sinapticamente collegata.