Valutazione delle interazioni batteri-cellule ospiti utilizzando le perle biomimetiche
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 4:06 min. • August 29th, 2025
Prelevare una piastra a più pozzetti contenente una coltura di cellule epiteliali di mammifero.
Nei pozzetti del test, aggiungere un agente patogeno batterico insieme a perle polimeriche accoppiate a proteine di superficie batteriche.
Nei pozzetti di controllo, aggiungere l'agente patogeno e le microsfere prive di proteine batteriche di superficie. Incubare.
Nei pozzetti del test, le perle imitano la superficie batterica e competono con l'agente patogeno per legarsi all'acido fosfatidico della membrana cellulare epiteliale, riducendo l'adesione batterica.
Nei pozzetti di controllo, le perle non influiscono sull'attaccamento batterico.
Rimuovere il supporto e lavare con tampone per eliminare i componenti non legati.
Incubare con un detergente non ionico per lisare le cellule, rilasciando batteri e perle attaccati alla membrana.
Pipettare il lisato per creare una sospensione omogenea e diluire in serie l'omogenato utilizzando il tampone.
Trasferire le diluizioni su piastre di agar, incubare per consentire la formazione di colonie e contare le colonie.
La piastra di prova mostra meno colonie rispetto ai controlli, indicando una riduzione delle interazioni batterico-ospite.
Prepara i t
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