JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:26 min • August 29th, 2025
I magnetospirillum sono batteri mobili che prosperano a basso contenuto di ossigeno.
Producono nanocristalli magnetici che agiscono come dipoli magnetici, aiutandoli a navigare nel campo geomagnetico verso una concentrazione ottimale di ossigeno.
Per coltivare il Magnetospirillum, assumere terreni liquidi privi di ossigeno. Iniettare un volume controllato di ossigeno per stabilire le condizioni microaerobiche, aggiungere batteri e incubare.
Nel tempo, la torbidità aumenta, indicando la crescita batterica.
Per preparare una coltura semisolida, utilizzare un terreno contenente un indicatore di ossigeno rosa che diventa incolore nella zona a basso contenuto di ossigeno, marcando l'interfaccia ossico-anossica (OAI) con una concentrazione ottimale
diossigeno.
Inoculare i batteri all'OAI, sigillare la provetta e incubare.
I batteri si moltiplicano per formare una banda che migra verso l'alto man mano che l'ossigeno viene consumato.
Per valutare il comportamento magnetotattico, preparare una goccia pendente dei batteri coltivati e posizionare un magnete vicino ad essa.
Al microscopio, osservare il nuoto direzionale verso il magnete e l'inversione del movimento quando il magnete viene capovolto.
Per inoculare i ceppi MSR-1, AMB-1 e MS-1 in mezzo liquido, fiammare la parte superiore delle bottiglie di ossigeno e terreno fresco applicando etanolo sui tappi e facendoli passare attraverso la fiamma di un bruciatore Bunsen.
Utilizzando una siringa sterile e un ago, estrarre un millilitro di ossigeno dalla bombola di ossigeno e trasferirlo nella bottiglia di terreno fresco. Se si utilizza l'inoculo di un'altra coltura coltivato in una bottiglia di vetro, fiammeggiare entrambe le bottiglie. Quindi inoculare un millilitro della coltura più vecchia nel terreno fresco.
Incubare la coltura a 32 gradi Celsius e inocularela in un terreno fresco dopo quattro-sette giorni. Per inoculare MSR-1 in gradiente di ossigeno, terreno semisolido, verificare che la provetta del terreno fresco mostri un OAI ben definito, materializzato da un'interfaccia da rosa a incolore da circa uno a tre centimetri sotto la superficie del mezzo. Se l'inoculo proviene da un'altra coltura semisolida con gradiente di concentrazione di ossigeno, raccogliere i batteri aspirando 50 microlitri di coltura con una punta di pipetta sterile posizionata sulla fascia formata dai batteri.
Inoculare lentamente questi batteri all'OAI nel terreno fresco, evitando di disturbare l'interfaccia. Sigilla il tubo e lascia che i batteri crescano tra i 25 gradi Celsius e i 30 gradi Celsius. Per assicurarsi che i batteri siano sia magnetici che modali, posizionare una goccia di coltura sul vetrino coprioggetto del microscopio.
Capovolgere il vetrino coprioggetti e installarlo su un O-ring appoggiato su un vetrino. Assicurarsi che la goccia non tocchi il vetrino inferiore. Posiziona la goccia pendente sotto un microscopio e metti a fuoco un bordo della gocciolina.
Posiziona il polo sud di un magnete vicino a quel bordo e osserva i batteri nuotare verso il bordo. Capovolgi il magnete per farli nuotare nella direzione opposta.
Magnetospirillum sono batteri mobili che prosperano in ambienti a basso contenuto di ossigeno e producono nanocristalli magnetici per la navigazione. Questo articolo descrive i metodi di coltura e le configurazioni sperimentali per lo studio del loro comportamento magnetotattico.
I batteri *Magnetospirillum* offrono un modello unico per lo studio del comportamento magnetotattico e della navigazione lungo gradienti di ossigeno, fornendo informazioni meccanicistiche rilevanti per la scoperta iniziale e la validazione degli obiettivi nella ricerca e sviluppo biofarmaceutica. La loro capacità di formare nanocristalli magnetici e di rispondere in modo prevedibile a variabili ambientali controllate permette test robusti delle ipotesi e una valutazione quantitativa delle risposte cellulari. Queste caratteristiche sostengono un'elevata affidabilità predittiva e la riduzione dei rischi in punti critici della pipeline di scoperta.
Questo metodo si integra nel percorso di scoperta, dall'iniziale verifica delle ipotesi allo sviluppo dei saggi e alla validazione dei modelli preclinici, sostenendo sia gli obiettivi di ricerca meccanicistica sia quelli traslazionali.
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Ultimo aggiornamento: 29 agosto 2026