Un metodo di microdiluizione in brodo per i test di suscettibilità agli antibiotici dei batteri Gram-positivi

Isolare le colonie batteriche Gram-positive da una piastra di coltura e sospenderle in un terreno.

Diluire la sospensione per ottenere la concentrazione batterica ottimale per il test.

Inoculare i pozzetti di prova di una micropiastra contenente concentrazioni crescenti di un antibiotico lipoglicopeptidico e di un pozzetto di controllo della crescita contenente solo il terreno.

Distribuire un'aliquota dal pozzetto di controllo sulle piastre di coltura per verificare la purezza della coltura e la conta batterica.

Incubare per consentire la crescita batterica, durante la quale viene sintetizzata la parete cellulare.

L'antibiotico si lega al peptidoglicano, un componente della parete cellulare, e ai suoi precursori, inibendo la polimerizzazione e indebolendo la parete.

L'interruzione consente alla pressione osmotica di causare la lisi cellulare.

Dopo l'incubazione, confermare la purezza della coltura e la conta batterica ottimale.

Ispezionare i pozzetti per la crescita batterica.

Il pozzetto di controllo mostra una crescita visibile, mentre il pozzetto del test con la più bassa concentrazione di antibiotico che inibisce completamente la crescita indica la concentrazione inibitoria minima (MIC)