Visualizzazione mediata da nanoparticelle del rimodellamento endolisosomiale in cellule infettate da batteri

Prendere un vetrino a camera contenente cellule epiteliali umane con endosomi marcati in fluorescenza.

Introdurre batteri patogeni intracellulari e incubarli, permettendo loro di aderire alle cellule.

I batteri iniettano proteine che riorganizzano il citoscheletro dell'ospite, formando sporgenze di membrana che internalizzano i batteri in vacuoli.

Questi vacuoli estendono proiezioni tubulari che si collegano al sistema endo-lisosomiale, una rete di vescicole e organelli che regolano il traffico intracellulare.

Queste proiezioni reindirizzano il trasporto delle vescicole e rimodellano il sistema endo-lisosomiale.

Lavare per rimuovere i batteri extracellulari, quindi incubare con un mezzo contenente antibiotici per eliminare eventuali batteri rimanenti.

Sostituire con un mezzo di imaging privo di siero contenente l'antibiotico e aggiungere nanoparticelle marcate con un fluoroforo contrastante.

Incubare per consentire l'ingresso di nanoparticelle attraverso l'endocitosi e l'accumulo nelle vescicole rimodellate.

Lavare per rimuovere le nanoparticelle non internalizzate, quindi incubare in un mezzo di imaging integrato con siero.

Le nanoparticelle fluorescenti e gli endosomi marcati consentono l