Comportamento di sciamatura di Pseudomonas aeruginosa sotto stress antibiotico

Posiziona una piastra di agar su un modello stampato per allineare il centro e sei punti satellite equidistanti.

Individua una sana coltura di Pseudomonas aeruginosa al centro del piatto.

Posizionare una miscela della stessa coltura con un antibiotico sui punti satellite.

Copri la piastra con un coperchio nero per ridurre i riflessi di luce.

Posizionalo su uno scanner all'interno di un'incubatrice con temperatura e umidità costanti per mantenere la crescita batterica.

I batteri sani al centro crescono e si diffondono verso l'esterno in schemi di sciame simili a viticci che si irradiano su tutta la superficie dell'agar.

I batteri mescolati con l'antibiotico subiscono stress e rilasciano segnali chimici che si diffondono attraverso l'agar.

Quando lo sciame raggiunge queste zone, percepisce i segnali di stress.

Questo innesca una risposta di evitamento, reindirizzando la crescita batterica lontano dalle regioni esposte agli antibiotici.

L'imaging time-lapse mostra la crescita batterica e i cambiamenti nell'espansione dello sciame sotto stress antibiotico.

Per la placcatura in agar a sciame, tenere un puntale per pipetta P20 caricato con cinque microlitri da una coltura notturna di P. aeruginosa