Imaging e quantificazione delle risposte di evitamento dello sciame allo stress antibiotico in Pseudomonas aeruginosa

Prendi una piastra di agar sciamante che supporta la motilità dello sciame, un movimento batterico coordinato su una superficie semisolida che forma motivi simili a viticci.

Inoculare al centro della piastra una coltura di Pseudomonas aeruginosa e posizionare una miscela della stessa coltura con un antibiotico in posizioni satellitari uniformemente distanziate.

Copri la piastra con un coperchio verniciato di nero per ridurre al minimo i riflessi di luce.

Posizionare la lastra su uno scanner piano all'interno di un'incubatrice mantenuta ad umidità ottimale.

Durante l'incubazione, la popolazione centrale inizia a moltiplicarsi e a sciamare.

Quando lo sciame si avvicina alle colonie trattate con antibiotici, rileva i segnali di stress secreti dai batteri e reindirizza per evitare queste regioni.

Lo scanner, controllato da un software automatizzato, acquisisce immagini ad alta risoluzione a intervalli regolari.

Compila queste immagini in un video per visualizzare la progressione e l'evitamento dello sciame nel tempo.

Quantifica l'evitamento dello sciame misurando la distanza da ciascuna colonia satellite al bordo dello sciame centrale in un'immagine in fase avanzata.

Dopo aver posizionato le la