Modellazione della colonizzazione vaginale murina da parte di batteri anaerobi

Prendiamo una femmina di topo trattata con un ormone che condiziona l'ambiente vaginale, aumentandone la suscettibilità alle infezioni.

Solleva il topo per la coda mentre afferra la gabbia con le zampe anteriori per sollevare i quarti posteriori ed esporre l'apertura vaginale.

Sciacquare il lume vaginale con un tampone anaerobico per eliminare il muco, una barriera protettiva contro gli agenti patogeni, insieme alle cellule epiteliali morte e ai microbi vaginali endogeni.

Inoculare immediatamente la vagina con una sospensione di un patogeno batterico anaerobico, mantenendo il topo trattenuto per ridurre al minimo la perdita di liquidi.

Per il co-inoculo, somministrare una sospensione di un altro patogeno batterico anaerobio utilizzando lo stesso volume di prima.

Alloggiare il topo inoculato separatamente dai topi non inoculati per prevenire la contaminazione incrociata.

Dopo l'inoculazione, i batteri aderiscono all'epitelio vaginale, crescono in colonie e sviluppano uno strato protettivo di biofilm che funge da barriera contro le risposte immunitarie dell'ospite.

Preparare le provette di lavaggio vaginale nella camera anaerobica pipettando 70 microlitri di PBS anaerobico sterile in provet