Seedling Flood Assay per lo screening della resistenza batterica nei pomodori

Per verificare la resistenza batterica in diversi ceppi di pomodoro, inizia con piantine di pomodoro di 10 giorni coltivate in condizioni sterili.

Queste piantine mostrano foglie vere emergenti e radici consolidate.

Inondare entrambi i ceppi con batteri patogeni mescolati con un tensioattivo per facilitare la diffusione uniforme dell'inoculo sulla superficie della pianta. Inclinare e agitare la piastra per massimizzare il contatto della piantina con l'inoculo.

Rimuovere l'inoculo in eccesso, richiudere le piastre e incubarle in una camera di crescita.

I batteri entrano attraverso gli stomi e colonizzano l'apoplasto, lo spazio extracellulare tra le cellule fogliari.

I batteri iniettano proteine effettrici nelle cellule vegetali per sopprimere le risposte immunitarie delle piante.

I ceppi suscettibili non riescono a rilevare questi effettori, consentendo la proliferazione batterica e il danno ai tessuti vegetali indotto dalle tossine batteriche.

I ceppi resistenti riconoscono gli effettori e producono specie reattive dell'ossigeno per uccidere i batteri.

Dopo l'incubazione, i ceppi resistenti mostrano una crescita sostenuta, mentre i ceppi sensibili mostrano uno sviluppo arrestato.

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