Un sistema di co-coltivazione per studiare le risposte molecolari delle piante ospiti e dei batteri interagenti

Prendi una vasca contenente un terreno di coltura sterile con un pH acido.

Trasferisci uno schermo a rete con piantine di piante nel serbatoio.

Sigillare con un coperchio e un nastro poroso per mantenere la sterilità consentendo lo scambio gassoso.

Incubare agitando per aerare il terreno.

Ispezionare il mezzo per verificare l'assenza di torbidità, che indichi l'assenza di contaminazione batterica.

Individuare un campione su una piastra di coltura e incubarlo per osservare l'assenza di crescita batterica, confermando l'assenza di batteri contaminanti.

Inoculare con Agrobacterium, un patogeno delle piante, e incubare.

Le molecole di segnalazione derivate dalle radici delle piante e il pH acido attivano una proteina sensore legata alla membrana batterica.

L'attivazione induce l'espressione genica, producendo proteine per l'attaccamento batterico alle superfici radicolari.

Dopo l'attaccamento, Agrobacterium rilascia un frammento di DNA, noto come DNA di trasferimento (T-DNA), nelle cellule vegetali attraverso un sistema di secrezione.

Dopo l'integrazione nel genoma della pianta, il T-DNA sintetizza molecole di segnalazione che migliorano la colonizzazione batterica.

In una cappa a flusso steriliz