Rilevamento di un analita target utilizzando un biosensore batterico

Iniziate con una provetta contenente una coltura batterica geneticamente modificata per fungere da biosensore.

I batteri ospitano un sistema plasmidico con una proteina fluorescente rossa o gene RFP sotto il controllo di un promotore. Il promotore è represso da una proteina sensibile alla presenza di un analita specifico, come il piombo.

Utilizzare un panno a base di etanolo per pulire a fondo una superficie di prova e raccogliere l'analita presente sulla superficie.

Tagliare una piccola sezione dal centro della salvietta e immergerla completamente nella coltura batterica.

Incubare per facilitare la diffusione dell'analita dalla salvietta alla coltura batterica.

L'analita entra nei batteri e si lega con la proteina repressore, modificandone la conformazione e attivando il promotore.

Il promotore attivato avvia la trascrizione genica, portando all'espressione della RFP.

Misurare la fluorescenza batterica per garantire la presenza dell'analita sulla superficie del test.

Utilizzare una salvietta a base di etanolo progettata per rimuovere il piombo per pulire tutte le superfici delle mani, anche tra le dita. Conservare le salviette in un sacchetto sigillabile adeguatamente etichettato fino all'analisi. Utilizzare una salvietta a base di alcol per pulire le grandi superfici da testare.

Utilizzare un batuffolo di cotone inumidito con etanolo per pulire eventuali piccole superfici da testare. Indossando guanti puliti e utilizzando forbici pulite con alcol, tagliare una sezione di circa un centimetro quadrato dal centro della salvietta. Quindi, posizionare il pezzo di salvietta tagliato, o batuffolo di cotone, direttamente in una provetta di coltura contenente due millilitri di batteri sensore e assicurarsi che sia completamente immerso nel brodo.