Stabilire una coltura binaria di saccaribatteri con batteri ospiti

Inizia con un tubo sterile contenente un terreno di coltura specifico per l'ospite. Aggiungi una coltura batterica dell'ospite cresciuta durante la notte.

Quindi, introdurre un filtrato contenente Saccharibacteria, un batterio parassita ultrapiccolo, per stabilire una coltura binaria.

Incubare la coltura binaria in condizioni microaerobiche ottimali per i batteri ospiti.

I nutrienti nel terreno favoriscono la crescita e la proliferazione dei batteri ospiti, rendendo la coltura torbida.

A causa della loro natura parassitaria obbligata, i saccaribatteri si attaccano alla superficie delle cellule batteriche ospiti.

Questi batteri formano quindi stretti contatti di membrana con l'ospite ed estraggono nutrienti essenziali per la loro sopravvivenza e proliferazione.

Con il progredire dell'infezione, la crescita dell'ospite batterico rallenta, con conseguente riduzione della torbidità.

Per supportare la crescita continua, trasferire la coltura binaria in un terreno fresco a intervalli regolari.

Ciò mantiene la vitalità dell'ospite e promuove la stabilità a lungo termine della cultura binaria.

Preparare le provette di coltura aliquotando due millilitri di terreno di coltura appropriato nelle provette.

Quindi, aggiungere 200 microlitri di coltura notturna di organismi ospiti e da 100 a 200 microlitri di campione filtrato risospeso in ciascuna provetta. Incubare i campioni combinati in condizioni adeguate all'organismo ospite. Far passare le cellule ogni due o tre giorni trasferendo 200 microlitri di coltura binaria in due millilitri di terreno di crescita fresco in una nuova provetta.

Se le colture passate non mostrano alcuna crescita a 200 microlitri di coltura ospite non infetta, durante il passaggio delle cellule, rimettere le provette inoculate nell'incubatore.