Coltura unicellulare di batteri all'interno di vescicole giganti

Inizia con un vetrino a camera rivestito con una membrana supportata composta da fosfolipidi, inclusi i fosfolipidi biotinilati.

Incubare con neutravidina, che si lega alla biotina sul doppio strato. Lavare per rimuovere l'eccesso di neutravidina.

Introdurre un mezzo nutritivo contenente vescicole giganti o GV. Ogni GV è una vescicola sferica a doppio strato lipidico di dimensioni micron che incapsula una singola cellula batterica, fungendo da modello per studiare il comportamento delle singole cellule in un ambiente confinato.

La neutravidina si lega ai lipidi GV biotinilati, fissando le vescicole alla membrana supportata per un'osservazione stabile e a lungo termine in condizioni statiche.

Sigillare la camera per mantenere l'idratazione e ridurre al minimo la contaminazione.

Posizionare il vetrino su un tavolino da microscopio dotato di una piattaforma riscaldante per simulare le condizioni fisiologiche e osservare al microscopio.

I nutrienti del terreno si diffondono nel GV per sostenere la crescita batterica nel tempo.

Questa configurazione consente la visualizzazione in tempo reale della crescita batterica di singole cellule all'interno di microambienti di vescicole confinate.

Per imm