Analisi microscopica della crescita batterica sotto stress mediante camere microfluidiche

Inizia con una piastra microfluidica riempita con un mezzo nutritivo preriscaldato.

Fissare la piastra al sistema di collettori e sigillare l'installazione. Guidare il fluido attraverso i canali per rimuovere eventuali bolle d'aria.

Posizionare la configurazione su un tavolino da microscopio e preriscaldarla per evitare l'espansione della piastra durante l'imaging.

Quindi, rimuovere il terreno, introdurre una coltura batterica negli ingressi cellulari e un mezzo che induce stress negli ingressi della soluzione.

Il mezzo che induce lo stress contiene un antibiotico che arresta la divisione cellulare senza inibire l'aumento della massa cellulare.

Sigillare il sistema, quindi avviare il caricamento delle cellule per trasferire i batteri nella camera di coltura della piastra.

Utilizzando la luce trasmessa, individuare un campo visivo contenente singole celle distribuite uniformemente.

Iniettare nella camera il mezzo che induce lo stress per esporre le cellule all'antibiotico.

Utilizzando la modalità a contrasto di fase, è possibile acquisire immagini time-lapse per osservare la formazione di cellule filamentose allungate con un aumento del contenuto di DNA causato dall'inibizione della divisio