JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:27 min. • September 26th, 2025
Inizia con una coltura di E. coli pretrattata con un antibiotico.
Questo antibiotico blocca la divisione cellulare, con conseguente formazione di cellule filamentose allungate con un aumento del contenuto di DNA.
Impiattare una parte della coltura su una piastra di agar ricca di sostanze nutritive e incubare.
Le cellule filamentose non si dividono nonostante la crescita continua; Solo le cellule non filamentose formano colonie, con conseguente basso numero di colonie.
Diluire la coltura batterica rimanente e aggiungere un colorante fluorescente legante il DNA. Quindi, incubare al buio.
Il colorante entra nelle cellule e si lega al DNA.
Agitare il campione e poi farlo passare attraverso un citometro a flusso.
La quantità di luce diffusa da ogni cella corrisponde alla sua dimensione.
Allo stesso modo, la fluorescenza emessa dagli acidi nucleici legati al colorante indica il contenuto di DNA batterico.
Le cellule trattate con antibiotici mostrano un aumento della dispersione e della fluorescenza, che riflette la crescita filamentosa e la continua replicazione del DNA senza divisione.
Ciò dimostra le modifiche nella fisiologia batterica causate dagli antibiotici che inibiscono la divisione cellu
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