Inattivazione dei batteri mediante mononucleotide flavina attivato dalla luce

Inizia inoculando un batterio patogeno in una provetta contenente un mezzo liquido.

Incubare per favorire la proliferazione batterica, quindi trasferire la coltura in provette fresche.

Centrifugare le celle in pellet e scartare il surnatante.

Risospendere i pellet batterici in soluzioni tampone contenenti concentrazioni crescenti di flavina mononucleotide (FMN), un fotosensibilizzante e una soluzione tampone senza FMN per fungere da controllo.

Mescolare accuratamente il contenuto del tubo e trasferire le sospensioni in tubi di vetro.

Esporre i tubi alla luce visibile per fotoattivare l'FMN, che reagisce con l'ossigeno molecolare per generare specie reattive dell'ossigeno (ROS).

I ROS danneggiano i componenti cellulari batterici, riducendo così la vitalità batterica.

Trasferire le aliquote del campione su un terreno solido, distribuirle uniformemente e incubare per consentire ai batteri vitali sopravvissuti di crescere in colonie.

Post-incubazione, quantificare le colonie e calcolare la percentuale di riduzione della vitalità batterica rispetto al controllo per valutare l'effetto dose-dipendente della FMN.

Inoculare una colonia di Staphylococcus aureus in 10 millilitri di brodo di lisogenia