JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:00 min. • October 30th, 2025
Prendi una sospensione omogenea di caseo, il materiale necrotico ricco di lipidi delle lesioni della tubercolosi, che ospita micobatteri tolleranti ai farmaci al suo interno.
Aggiungere il farmaco in esame all'omogenato e al vortice per facilitarne l'interazione con la matrice del caseo.
Posizionare un inserto per dialisi a rapido equilibrio, contenente camere donatrici e riceventi separate da una membrana semipermeabile, nella piastra di base.
Caricare l'omogeneizzato addizionato di farmaco nella camera donatrice e aggiungere il tampone alla camera ricevente.
Sigillare la piastra e incubare con la rotazione.
Durante l'incubazione, il farmaco libero si diffonde attraverso la membrana, raggiungendo l'equilibrio tra le due camere.
Una volta raggiunto l'equilibrio, diluire il campione donatore con tampone e il campione ricevente con omogenato libero da farmaci per normalizzare le condizioni della matrice per la quantificazione del farmaco.
Infine, quantificare la concentrazione del farmaco e calcolare la frazione del farmaco non legato o fu.
Il fu riflette il farmaco libero disponibile per diffondersi nel caseo e raggiungere micobatteri tolleranti ai farmaci.
Aggiungere 6,5 microlitri del comp
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