Preparazione della coltura di Salmonella typhimurium

Prendi una piastra di coltura contenente Salmonella typhimurium, un batterio patogeno.

Utilizzando un ansa batterica sterile, scegli una singola colonia ben isolata per garantire la purezza della coltura e inoculala nel brodo per infusione di cuore cerebrale.

Incubare con agitazione per una corretta aerazione e una distribuzione uniforme dei nutrienti, favorendo la proliferazione batterica.

Diluire la coltura notturna in brodo fresco per prevenire l'esaurimento dei nutrienti e mantenere la crescita esponenziale.

Continuare l'incubazione agitando.

Utilizzare uno spettrofotometro per misurare la densità ottica (OD) per monitorare la crescita batterica.

Consentire alla coltura di raggiungere un OD di circa uno. Questo indica la fase di crescita esponenziale, durante la quale i batteri utilizzano attivamente i nutrienti per andare incontro a una rapida proliferazione.

Trasferire la coltura in una provetta e centrifugare per separare i batteri.

Scartare il surnatante e risospendere i batteri in un tampone per preservare l'integrità batterica.

Centrifugare e rimuovere il terreno residuo.

Risospendere i batteri in un tampone fresco per ottenere una sospensione uniforme e priva di contaminazioni.

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