Una tecnica per preparare una coltura batterica monoclonale

Iniziare con una coltura batterica ed eseguire una diluizione seriale per ridurre la densità cellulare.

Prelevare una piccola aliquota della diluizione finale e posizionarla su una piastra di agar.

Aggiungere perle di vetro sterili e agitare delicatamente la piastra per garantire la separazione spaziale delle cellule, essenziale per ottenere colonie ben isolate.

Rimuovere le perle di vetro, quindi capovolgere la piastra e incubare.

Le singole cellule proliferano e formano colonie separate, generando una coltura monoclonale in cui ogni colonia è costituita da una popolazione batterica geneticamente uniforme.

Prelevare le singole colonie e trasferirle in provette separate contenenti un mezzo liquido.

Incubare le provette con agitazione. Dopo l'incubazione, valutare la torbidità di ciascuna coltura.

Le cellule batteriche sospese nel mezzo diffondono la luce, facendo apparire le colture più torbide con l'aumentare della densità cellulare.

Selezionare la provetta con la torbidità più elevata, che indica la popolazione batterica monoclonale più densa, per le applicazioni a valle.

Etichettare le tre bottiglie preparate con 100 millilitri di brodo LB Lennox con il numero uno, il numero due e il num