Produzione e deposizione per aerosol di spore di Bacillus subtilis

Inizia con una coltura di Bacillus subtilis, un batterio sporigeno altamente resistente.

Inoculare la coltura in un terreno a basso contenuto di nutrienti e incubare con aerazione per indurre la sporulazione.

Le cellule sporulanti producono spore dormienti con strati protettivi.

Trasferire la coltura in una provetta e centrifugare per pellettare le spore. Rimuovere il surnatante contenente le cellule residue e i detriti.

Lavare il pellet con acqua distillata sterile, ripetere la centrifugazione e risospendere le spore in acqua sterile.

Utilizzando un microscopio a contrasto di fase, è possibile confermare la purezza delle spore identificando le spore luminose e verificando l'assenza di contaminanti.

Eseguire diluizioni seriali delle spore, impiattare l'agar nutriente e incubare per consentire la germinazione delle spore vitali nelle colonie. Conta le colonie per determinare la concentrazione di spore.

Sulla base di questa concentrazione, regolare la quantità di spore e caricare il campione diluito in un ugello per aerosol. Spruzzarlo su una superficie di vetro sterile dove la sospensione si asciuga rapidamente per formare un monostrato sottile e uniforme di spore.

Per effettuare la produzi