Preparazione di un terreno di espettorato artificiale per emulare la fibrosi cistica espettorato polmonare ex vivo
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:48 min. • October 30th, 2025
La fibrosi cistica (FC) è una malattia genetica che causa l'accumulo di muco denso e appiccicoso nei polmoni, formando l'espettorato che supporta la crescita microbica patogena.
Per preparare l'espettorato fibrosi cistica artificiale, assumere soluzioni con proprietà biochimiche chiave.
La miscela di mucina contiene mucine, che sono glicoproteine ad alto peso molecolare, per replicare la viscosità dell'espettorato CF e promuovere l'adesione microbica.
La miscela chimica fornisce ioni e glucosio per supportare il metabolismo microbico.
La miscela biologica fornisce nutrienti per la crescita microbica.
Combina il tutto per formare il mezzo di espettorato artificiale (ASM).
Aggiungere un agente tampone per mantenere un pH leggermente acido che favorisce la sopravvivenza degli agenti patogeni.
Per la sterilizzazione media, trasferire l'ASM in una camera di filtrazione sottovuoto con un filtro a membrana.
Filtrare sotto agitazione per evitare l'aggregazione della mucina e prevenire l'intasamento del filtro.
Il vuoto aspira il mezzo attraverso il filtro, rimuovendo i contaminanti microbici e gli aggregati macromolecolari.
L'ASM è pronto per la coltura di microbi associati alla fibrosi cistica.
Prep
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