JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
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Iniziare con una micropiastra contenente omogeneizzati preparati con mosche Drosophila . Queste mosche ospitavano una popolazione controllata di un batterio specifico nel loro intestino.
Gli omogeneizzati contengono tessuti di mosca lisati e batteri intestinali rilasciati.
Aspirare i batteri sospesi e diluirli in serie su più micropiastre.
Individuare piccoli volumi da ogni diluizione su piastre di agar, assicurandosi che le goccioline rimangano separate.
Incubare per consentire ai batteri di proliferare in colonie visibili.
Acquisisci immagini delle piastre per quantificare le unità formanti colonie (CFU), che rappresentano il numero di cellule batteriche vitali in grado di formare singole colonie.
Utilizzando un software di analisi delle immagini, allinea ogni immagine utilizzando una linea di riferimento, definisci un confine e applica una griglia uniforme per segmentarla in zone di conteggio, ciascuna corrispondente a un singolo punto.
Regola la soglia di luminosità per distinguere le singole colonie dallo sfondo, quindi esegui l'analisi per contare le colonie in ogni punto e quantificare i CFU.
Posizionare tre piastre rettangolari per la crescita dell'agar MRS con i coperchi aperti ne
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