Trattamento dei batteri con essudati radicali delle piante per emulare le interazioni pianta-microbi in vitro

Prendi una coltura stock di Bacillus mycoides, un rizobatterio che promuove la crescita delle piante, e spruzza un inoculo su una piastra di coltura.

Incubare la piastra per favorire la proliferazione batterica nelle colonie.

Inoculare una singola colonia in un mezzo liquido e incubare agitando per favorire la crescita batterica.

Diluire la coltura utilizzando il terreno liquido per ottenere la densità ottimale per il saggio.

Aggiungi essudati di radice di patata alla coltura per emulare le interazioni pianta-microbi.

Incubare la coltura con agitazione, facilitando l'interazione delle molecole di segnalazione con i recettori batterici.

Questa interazione induce vie di segnalazione che attivano le proteine regolatorie, che si legano al DNA e alterano l'espressione genica.

Trasferire la coltura in una provetta e far girare le cellule batteriche in un pellet.

Scartare il surnatante e immergere la provetta nell'azoto liquido per congelare le cellule.

Conservare le cellule per analizzare i cambiamenti indotti dall'essudato delle radici delle piante nell'espressione genica batterica.

Per far crescere i batteri, striare un ceppo di B. mycoides da una scorta di glicerolo a meno 80 gradi Celsius su u