JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:54 min. • October 30th, 2025
Inizia con una coltura di cianobatteri, che sono batteri fotosintetici.
Questi batteri contengono goccioline di plastoglobuli ricche di lipidi e membrane tilacoidali, che sono strutture membranose ripiegate ricche di pigmenti fotosintetici.
Centrifugare la coltura e scartare il surnatante per rimuovere i polisaccaridi extracellulari prodotti dai batteri. Lavare il pellet, quindi rimetterlo in un tampone.
Utilizzare un omogeneizzatore ad alta pressione per generare una forza di taglio, che distrugge le pareti cellulari e le membrane.
La rottura delle membrane tilacoidi rilascia pigmenti fotosintetici nel lisato. Il rilascio del pigmento provoca un cambiamento di colore che indica la disgregazione cellulare e il rilascio di plastoglobuli.
Caricare il lisato nelle provette da centrifuga, quindi aggiungere una soluzione di saccarosio per formare un gradiente di densità.
Centrifuga per separare i componenti cellulari per densità.
Il tilacoide e altri componenti più pesanti si ritrovano nella parte inferiore, mentre i plastoglobuli a bassa densità galleggiano verso l'alto come una banda distinta.
Raccogliere la frazione di plastoglobulo e conservarla congelandola per ulteriori analisi.
Coltiva 50
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